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凡在本公司購買MLR-Bf人混合淋巴細胞反應(yīng)封閉因子酶聯(lián)免疫試劑盒,可提供免費代測服務(wù),視樣本數(shù)量而定出結(jié)果時間,一般一周內(nèi)出檢測結(jié)果!
實驗原理:
試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中MLR-Bf表達。用純化的MLR-Bf抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中MLR-Bf相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的MLR-Bf抗體結(jié)合,形成抗體 抗原 酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定標(biāo)本中MLR-Bf的存在與否。
樣本要求:
1.MLR-Bf人混合淋巴細胞反應(yīng)封閉因子酶聯(lián)免疫試劑盒標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作程序:
操作步驟:
1. 編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50%l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,然后再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50%l,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
注意事項:
1.MLR-Bf人混合淋巴細胞反應(yīng)封閉因子酶聯(lián)免疫試劑盒操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 1530 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。
保存條件及有效期:
1.MLR-Bf人混合淋巴細胞反應(yīng)封閉因子酶聯(lián)免疫試劑盒試劑盒保存:;28℃。
2.有效期:6 個月
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測,標(biāo)本對環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內(nèi)客戶)。
6、代測免收代測費,一周出結(jié)果。
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