產品目錄

產品名稱	英文名稱	規格	貨號
柱式中量血液基因組DNA提取試劑盒(1～5ml)	Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)	50次	CS-01F99058

本試劑盒適用于從新鮮或冷凍全血(用檸檬酸鹽、EDTA或肝素等抗凝劑處理過的血液樣品)、血漿、血清、血沉棕黃層、骨髓、無細胞體液等樣本中提取總DNA，包括基因組DNA，線粒體DNA及病毒DNA。本品采用柱式提取方法，可以處理1-5ml的全血，可純化獲得大小為100bp到50kb的DNA，純化的DNA產量高、質量好，最大限度去除蛋白、色素、脂類及其他抑制性雜質污染，可直接用于PCR、熒光定量PCR、酶切和Southern Blot等實驗。

保存條件：Buffer RCL 2～8℃，其他組分室溫(15～30℃)

自備試劑：無水乙醇。

實驗前準備及重要注意事項：

1、向蛋白酶K 中加入5ml 蛋白酶K 儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時間室溫放置，避免反復凍融，以免影響其活性。

2、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量下降。

3、本試劑盒最多可以提取1-5ml全血樣品，如需提取大量血液樣本請選用血液基因組非柱式提取試劑盒(#WE0176)。

4、第一次使用前應按試劑瓶標簽說明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。

5、使用前請檢查Buffer GL是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，請置于56℃水浴重新溶解。

6、如下游實驗對RNA污染較敏感，可加入4μl DNase Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本試劑盒并未提供，如需要可單獨向本公司訂購，貨號：WE0225S。

7、試劑盒中的Buffer RCL渾濁后不能繼續使用。

操作步驟：

1、向離心管(自備)中加入1-5ml血液樣品，加入3倍體積的Buffer RCL輕輕渦旋或顛倒混勻。

2、3000 rpm(～900×g)離心10分鐘，小心吸棄上清。

3、向沉淀中加入400μl Buffer GR，重懸沉淀。

注意：如果下游試驗對RNA敏感，可加入4μl RNase A(100 mg/ml)溶液，震蕩15秒，室溫放置5分鐘。

4、1-2ml血液樣本提取時,向以上溶液中加入40μl 蛋白酶K ，混勻；2-5ml血液樣本提取時,向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ，混勻。

5、加入400μl Buffer GL，顛倒混勻15次，劇烈渦旋震蕩至少1分鐘。

注意：不要直接將蛋白酶K 直接加入到Buffer GL中。
6、70℃孵育10分鐘，其間顛倒混勻數次。

實驗步驟：

(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻

(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次

(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)

(7)10,000rpm,4℃離心20min

(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃離心20 min

(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC處理水溶解

(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量

(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)

操作步驟:

1. 勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。

b.單層培養細胞直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。

c．細胞懸液離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。產品僅用于科研

2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物完全分離。

3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。

5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。

6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。

7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。

8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

在線咨詢

留言注意事項：

1.遵守中華人民共和國有關法律、法規，尊重網上道德，承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。

2.請您真實的反映產品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產品有任何疑問,也可以留言咨詢。

3.未經本站同意，任何人不得利用本留言簿發布個人或團體的具有廣告性質的信息或類似言論。

您感興趣的產品*
您的單位*
聯系人*
聯系電話*
詳細地址*
常用郵箱*
請輸入您對我們的意見或建議*
驗證碼*

同類產品

96孔板質粒DNA小量提取試劑盒(2mL，磁珠法) 96孔板質粒DNA小量抽提試劑盒(2mL，板吸附法) 離子交換型質粒DNA提取試劑盒(100～200mL) 磁珠法石蠟包埋組織DNA提取試劑盒磁珠法游離DNA提取試劑盒去內毒素質粒DNA小量抽提試劑盒(1.5～3mL) 土壤基因組DNA提取試劑盒（磁珠法) 糞便基因組DNA提取試劑盒（磁珠法) 血漿/血清游離DNA提取試劑盒（磁珠法) 拭子/唾液基因組DNA提取試劑盒（磁珠法)

訂購流程

訂貨流程

產品訂購說明:

1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可聯系客服安排專人取樣（限省內客戶）。

6、代測免收代測費，一周出結果。

7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內為您補發損壞產品。

8、如因單位財務制度原因，可申請先發貨，報賬后付款（此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶）。

付款方式

普票匯款信息

賬戶名：上海生物

開戶行：中國銀行山東省分行營業部

賬號：2169 2341 6278

為方便廣大客戶辦理貨款我公司提供多個銀行的賬戶，學校、醫院客戶購買產品如因單位財務制度原因可先發貨待報賬后匯款，請及時告知銷售人員已做具體操作。

世俱杯2025赛程_中国足彩网首页官网_埃弗顿vs托特纳姆热刺_中国女排现状 - 奥运女足历届冠军一览表

柱式中量血液基因組DNA提取試劑盒(1～5ml)

產品目錄

聯系我們

技術服務

商品詳情購物流程代測服務付款方式常見問題

在線咨詢

同類產品

訂貨流程

付款方式