產品目錄

1.切取不多于30mg的組織材料，放入裝有200μL溶液A的離心管中，渦旋振蕩15秒。注意：根據提取的組織不同，起始量也稍有不同，腮的細胞量較大，一般建議提取量不超過20mg。如果需要去除RNA，可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客戶自備，BTN3160)，振蕩15秒，室溫放置5分鐘。

2.加入20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL)，渦旋混勻，簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。在56℃下放置，直至組織完全溶解，簡短離心以去除管蓋內壁的水珠，再進行下一步驟。注意：不同組織裂解時間不同，通常需0.5～2小時即可完成。扇貝組織0.5小時基本可裂解完全，蝦和魚類組織1小時。每小時振蕩混合樣品2～3次，每次振蕩混勻15秒。

3.加入200μL溶液B，充分顛倒混勻，70℃放置10分鐘，溶液應變清亮，簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。注意：加入溶液B時可能會產生白色沉淀，一般70℃放置時會消失，不會影響后續實驗。如溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹底，可能導致提取DNA量少和提取出的DNA不純。

4.加入200μL無水乙醇，充分顛倒混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，簡短離心以去除管蓋內壁的水珠。

5.將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個離心吸附柱中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm(～13400×g)離心30秒，倒掉廢液，將吸附柱放回收集管中。

6.向離心吸附柱中加入500μL溶液C(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm(～13400×g)離心30秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。

7.向吸附柱中加入600μL通用洗柱液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm(～13400×g)離心30秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。

8.重復操作步驟7。

9.將吸附柱放回收集管中，12000rpm(～13400×g)離心2分鐘，倒掉廢液。將吸附柱置于室溫放置數分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應(酶切、PCR等)實驗。
10.將吸附柱轉入一個干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50～200μL通用洗脫液，室溫放置2～5分鐘，12000rpm(～13400×g)離心2分鐘，將溶液收集到離心管中。注意：通用洗脫液的體積不應少于50μL，體積過小影響回收效率。為增加基因組DNA的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱中，室溫放置2分鐘，12000rpm(～13400×g)離心2分鐘。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用超純水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5范圍內，pH值低于7.0會降低洗脫效率；且DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。

實驗步驟：

(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻

(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次

(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)

(7)10,000rpm,4℃離心20min

(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃離心20 min

(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC處理水溶解

(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量

(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)

操作步驟:

1. 勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。

b.單層培養細胞直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。

c．細胞懸液離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。產品僅用于科研

2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物完全分離。

3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。

5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。

6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。

7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。

8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

在線咨詢

留言注意事項：

1.遵守中華人民共和國有關法律、法規，尊重網上道德，承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。

2.請您真實的反映產品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產品有任何疑問,也可以留言咨詢。

3.未經本站同意，任何人不得利用本留言簿發布個人或團體的具有廣告性質的信息或類似言論。

您感興趣的產品*
您的單位*
聯系人*
聯系電話*
詳細地址*
常用郵箱*
請輸入您對我們的意見或建議*
驗證碼*

同類產品

96孔板質粒DNA小量提取試劑盒(2mL，磁珠法) 96孔板質粒DNA小量抽提試劑盒(2mL，板吸附法) 離子交換型質粒DNA提取試劑盒(100～200mL) 磁珠法石蠟包埋組織DNA提取試劑盒磁珠法游離DNA提取試劑盒去內毒素質粒DNA小量抽提試劑盒(1.5～3mL) 土壤基因組DNA提取試劑盒（磁珠法) 糞便基因組DNA提取試劑盒（磁珠法) 血漿/血清游離DNA提取試劑盒（磁珠法) 拭子/唾液基因組DNA提取試劑盒（磁珠法)

訂購流程

訂貨流程

產品訂購說明:

1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可聯系客服安排專人取樣（限省內客戶）。

6、代測免收代測費，一周出結果。

7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內為您補發損壞產品。

8、如因單位財務制度原因，可申請先發貨，報賬后付款（此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶）。

付款方式

普票匯款信息

賬戶名：上海生物

開戶行：中國銀行山東省分行營業部

賬號：2169 2341 6278

為方便廣大客戶辦理貨款我公司提供多個銀行的賬戶，學校、醫院客戶購買產品如因單位財務制度原因可先發貨待報賬后匯款，請及時告知銷售人員已做具體操作。

世俱杯2025赛程_中国足彩网首页官网_埃弗顿vs托特纳姆热刺_中国女排现状 - 奥运女足历届冠军一览表

海洋動物DNA提取試劑盒(柱式提取)

產品目錄

聯系我們

技術服務

商品詳情購物流程代測服務付款方式常見問題

在線咨詢

同類產品

訂貨流程

付款方式