產(chǎn)品目錄

聯(lián)系我們

聯(lián)系人:高小姐

電話:021-59541103 021-60443211

手機(jī):13585831301

Q Q： 3004967995

Email:3004967995@qq.com

詳細(xì)地址：上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

技術(shù)服務(wù)

人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實驗技術(shù)

小鼠細(xì)胞色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒注意事項

小鼠糖皮質(zhì)激素受體αelisa檢測試劑盒樣本處理及要求

人T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白分子3洗滌方法

兔β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測試劑盒注意事項

谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）測試盒實驗通用規(guī)則

NADP磷酸酶（NADPase）測試盒操作步驟

非紅細(xì)胞血影蛋白β4（SPTβN4）ELISA試劑盒樣本處理及要求

人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2（GSK2）ELISA試劑盒實驗通用規(guī)則

人抑制素（INH）免疫組化試劑盒實驗操作洗板方法

商品詳情購物流程代測服務(wù)付款方式常見問題

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	規(guī)格	貨號
一管式植物DNA提取試劑盒	One-tube Plant DNA extraction kit	50次	CS-01F99011

介紹

本試劑盒是一管式超快植物葉片和種子基因組DNA提取試劑，得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速，尤其適合于大規(guī)模的PCR篩選。

產(chǎn)品特點：

1.快速，整個過程只需要15分鐘左右，不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA沉淀。

2.一管式，在一個試管內(nèi)完成所有操作，不容易交叉污染，。

3.裂解液可以直接用于PCR，剩余樣品可以在4℃保存一月以上。

4.便于高通量和自動化，適合于科研單位、海關(guān)和企業(yè)對葉片和種子進(jìn)行大規(guī)模的PCR篩選。

5.適用于大多數(shù)植物葉片和種子。

儲存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

使用方法：

準(zhǔn)備工作：溶液A有少量絮狀物，用前最好37℃水浴10分鐘使其溶解。

1.在0.5mL塑料離心管加入0.1mL溶液A。

2.將直徑約為0.5-0.7cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤?/span>)的植物葉片直接加到溶液A中。葉片樣品可以用直徑為6毫米的辦公用打孔器獲得，葉片不需要搗碎。如果使用種子，需要先將種子敲碎，然后取一碎片(約1/4粒豌豆大小)直接使用。

3.95℃保溫10-15分鐘。如果保溫時間不夠，容易產(chǎn)生非特異擴(kuò)增。

4.加入0.1mL溶液B，用手搖晃約10次混勻。

5.不離心而直接取上清液作為模版進(jìn)行PCR，模板的體積占PCR體積的1/10為宜。

6.剩余樣品可以放4℃保存。
注意:本產(chǎn)品提取的DNA不能用電泳方法檢測。

實驗步驟：

(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻

(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次

(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)

(7)10,000rpm,4℃離心20min

(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃離心20 min

(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC處理水溶解

(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量

(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))

操作步驟:

1. 勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。

b.單層培養(yǎng)細(xì)胞直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。

c．細(xì)胞懸液離心收集細(xì)胞，每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。產(chǎn)品僅用于科研

2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物完全分離。

3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。

5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。

6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。

7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。

8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

在線咨詢

留言注意事項：

1.遵守中華人民共和國有關(guān)法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔(dān)一切因您的行為而直接或間接引起的法律責(zé)任。

2.請您真實的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產(chǎn)品有任何疑問,也可以留言咨詢。

3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個人或團(tuán)體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。

您感興趣的產(chǎn)品*
您的單位*
聯(lián)系人*
聯(lián)系電話*
詳細(xì)地址*
常用郵箱*
請輸入您對我們的意見或建議*
驗證碼*