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標簽:柱式植物DNA提取試劑盒 50次
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產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 | 貨號 |
柱式植物DNA提取試劑盒 | Plant DNA column extraction kit | 50次 | CS-01F99008 |
本試劑盒是在植物DNA提取試劑盒基礎上開發的柱式植物基因組DNA提取產品,可以用于多種植物基因組DNA(含葉綠體和線粒體DNA)的快速提取。
產品特點: 1. 純度高,不含污染和抑制劑,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各種后續分子生物學實驗。 2.產率一般在3-30μg/100mg樣品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段長度一般在40-50 Kb左右。 3.適用范圍廣,可以使用于絕大多數植物的各種組織。 4. 不會發生離心柱堵塞現象。 儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。 使用方法: 注意:溶液A和溶液B容易產生沉淀,溶液B比較粘稠,用前均需要放置在65℃預熱使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分搖勻。 1. 65℃預熱柱式植物DNA提取試劑盒溶液A,待其沉淀溶化后,充分混勻,取0.75mL加入到10mL塑料離心管中并放置于65℃待用。 2. 稱取植物組織0.1-0.5 g左右,剪成微小的碎片,加入到有溶液A的10mL塑料離心管中并短暫勻漿。也可以液氮研磨后將粉末加入到管中(建議不要在陶器或玻璃研缽中破碎細胞,因為二氧化硅會非特異地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研缽中研磨)。勻漿過程中將產生大量泡沫,屬于正常現象。 3. 將勻漿液(包括植物碎片)全部轉移到新的1.5mL塑料離心管(此時勻漿液較為粘稠,可將槍頭剪去一截后轉移上清,不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。 4.在勻漿液中加入0.5倍體積預熱的溶液B到離心管中,顛倒數次混勻。此時溶液中可能有白色絲狀懸浮物產生。(由于溶液B比較粘稠,可以將1mL槍頭剪去一截再吸取)。 5. 65℃水浴3~5分鐘。如果室溫放置,DNA產量會降低10-20%。 6. 加入200μl自備氯仿,震蕩混勻10-30秒,此時溶液將呈乳白色。 7. 12000rpm室溫離心2分鐘。此時上清液將變得透明,中間層有白膜。小心轉移上清液到一個新的1.5mL塑料離心管中,避免觸及中間層的白膜。 8. 加入1.5倍體積的溶液C,顛倒混勻后全部轉移到離心吸附柱中,室溫放置至少2分鐘。 9. 12000rpm室溫離心1分鐘,DNA 將吸附在離心吸附柱的膜上,倒棄收集管中的穿透液。 10. 將0.5mL通用洗柱液加入離心柱中,12000rpm室溫離心1分鐘,棄穿透液。 11. 重復上步操作一次。 12. 空甩半分鐘去除殘留液體,將離心吸附柱轉移到新的1.5mL離心管中。 13. 將離心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料離心管中,加50-100μL DNA 洗脫液2.0,室溫放置3~5分鐘。 14. 12000rpm室溫離心1分鐘即得植物DNA溶液。 15. 由于本產品使用的離心吸附柱吸附DNA的能力較強,可以重復上步操作一次,以洗脫得到更多的DNA。 |
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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