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產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 | 貨號 |
DSP交聯劑(不溶于水) | Dithiobis(succinimidylpropionate) | 100mg|500mg | CS-01F98867 |
DSP是不溶于水的同型雙功能的N-羥基琥珀酰亞胺酯(NHS-酯)。DTSSP是其水溶性類似物。這些交聯劑是硫醇可裂解的,與伯胺反應的并且已經用于很多應用中。NHS-酯能夠與伯氨基(-NH2)有效反應形成穩定的酰胺鍵,釋放N-羥基琥珀酰亞胺。DSP是非磺化的,因此是疏水性的,而DTSSP是磺化的和水溶性的。需要將DSP先溶解在有機溶劑中再加入到水相反應混合物中。因為DSP沒有具有帶電荷的基團,所有是親脂性和可滲透膜的,能夠用于細胞內和膜內蛋白質的共軛反應。DTSSP則可以直接添加到水相中,用于交聯細胞表面蛋白質。
基本信息: 分子量:404.42 間隔臂:12Å 化學式:C14H16O8N2S2 保存:-20℃ 使用方法: 一、在溶液中交聯蛋白的方法 所需材料 交聯劑溶液:將DSP溶于無水DMSO中,10~25mM。DTSSP可溶于水,緩沖液或直接加入樣品?;蛟?/span>pH5.0,5mM檸檬酸鈉緩沖液中制備DTSSP,并逐滴加入到反應混合物中。丟棄任何未使用的重構交聯劑。 反應緩沖液:磷酸鹽緩沖液,HEPES,pH7~9的碳酸氫鹽/碳酸鹽或硼酸鹽緩沖液。避免含有伯胺的緩沖液,因為胺將與交聯反應競爭。 步驟: 用反應緩沖液配制蛋白質溶液。如果樣品溶液含有Tris或甘,則需在反應緩沖液進行深度透析。 向蛋白質樣品中加入所需的交聯劑。如果蛋白質濃度大于5mg/ml,則使用10倍摩爾過量的交聯劑。若樣品小于5mg/ml,使用20~50倍摩爾過量的交聯劑。建議使用的交聯劑終濃度為0.25~5mM。 將反應混合物在室溫下孵育30分鐘或在冰上孵育2小時。 |
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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