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蛋白濃縮柱(0.5ml)

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  • 產品產地：國產
  • 包裝類型:盒裝
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  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容：蛋白濃縮柱(0.5ml)現貨供應，價格實惠。

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蛋白濃縮柱(0.5ml)

 

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CS-01F98512

白濃縮柱是一種方便的蛋白濃縮脫鹽工具，只需要離心操作即可以用來對蛋白質液體樣本進行濃縮，還可以用于蛋白質、抗原、抗體、酶和微生物的濃縮純化。也可以用來對蛋白質樣品中的鹽分、糖類、核酸、非水溶劑及其他一些低分子量物質進行去除和緩沖液置換。還可以用來分離蛋白質標記時未結合上的游離標記物。

蛋白濃縮柱使用蛋白質低吸附性的再生纖維素過濾膜制造，具有快速、方便、回收率高的特點，可替代并優于透析及蛋白沉淀法蛋白濃縮。

蛋白濃縮柱有多種規格可供選擇。

儲存條件：室溫避光保存。

用過的濃縮管要保持過濾膜濕潤，不能干掉。

注：濃縮柱配有2個微量離心管。

在操作過程中，一個可用于收集濾出液，而另一個用于回收濃縮后的樣本。

有效期：一年。

應用場景：

1．對稀釋或從柱洗脫液預先純化的蛋白質進行濃縮；

2．組織培養提取物或細胞裂解液中大分子組分的純化；

3．生物樣品濃縮：包括各種抗原、抗體、酶、核酸或微生物；

4．脫鹽和緩沖液更換。

產品特點：

1．高回收率 >90%；

2．垂直結構的膜減少了濃差極化，加快離心速度，快達 5分鐘；

3．熱密封膜將下游溶出物污染可能性降到低；

4．100% 完整性檢測確保性能可靠；

5．透明外殼和體積刻度方便樣品察看；

6．直接吸取樣品減少處理步驟；

7．高濃縮倍數：高達80–100倍

自備試劑耗材和儀器：
● 純水 ● 吸頭、離心管 ● 移液器 ●冰盒 ●離心機；可容納1.5ml微量離心管的固定角度轉子離心機。●冰箱
實驗步驟：
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻  
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。產品僅用于科研
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物完全分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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