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重組人胰島素

  • 產品貨號：CS-01F98233
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：國產
  • 包裝類型:盒裝
  • 采購熱度：334
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  • CAS號：
  • 方法：
  • 含量：25mg|100mg|500mg
  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容：重組人胰島素現貨供應，價格實惠。

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標簽:重組人胰島素 25mg 100mg 500mg 

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重組人胰島素

Insulin, human recombinant

25mg|100mg|500mg

CS-01F98233

本品為基因重組技術制備的全長序列的人胰島素，分子量大約為5800 Da，結構與天然來源的人胰島素相同，常用作細胞培養的輔助成分，常見使用濃度為1-10 μg/ml。

胰島素（insulin）是中胰島β細胞分泌的一種雙鏈形式（α, β）的多肽激素，由51個氨基酸組成，其中α鏈包含21個氨基酸，β鏈包含30個氨基酸。兩條鏈間通過二對二硫鍵連接，而α鏈自身還含有一對二硫鍵。胰島素的分泌過程是：前胰島素原的氨基末端攜帶有一段23-30氨基酸的信號肽，該信號肽可將前胰島素原轉移至內質網，然后立即被切斷，釋放出胰島素原。胰島素原由胰島素β鏈、C-肽和α鏈組成，釋放出的胰島素原隨即被轉至高爾基體，在此被包裝并轉化成胰島素，與C-肽一同釋放至血液。

胰島素是目前已知的機體內能降低血糖的蛋白激素，不僅負責調控細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝入，利用和儲存，而且抑制糖原，蛋白質和脂肪的降解發生。不同物種胰島素功能大體相同，只是氨基酸組成上的差異。

來源：大腸桿菌

CAS：11061-68-0

分子式：C257H383N65O77S6

分子量：5807.57

外觀：白色精細粉末

活性（Potency）：≥27.5 USP U/mg

純度：95%-105%

鋅含量（Zinc Amount ）：≤1.0%（若實驗要求去除鋅離子，可將胰島素溶解在稀醋酸內，加入過量EDTA螯合鋅離子，然后等電點沉淀純化胰島素）

溶解性：不溶于中性pH水，溶于稀醋酸或稀鹽酸（pH 2-3）

等電點（pI）：pl = 5.3（天然蛋白）

序列：A-Chain: G-I-V-E-Q-C-C-T-S-I-C-S-L-Y-Q-L-E-N-Y-C-N

B-Chain: F-V-N-Q-H-L-C-G-S-H-L-V-E-A-L-Y-L-V-C-G-E-R-G-F-F-Y-T-P-K-T
儲存條件：-20℃干燥
實驗步驟：
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻  
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。產品僅用于科研
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物完全分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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