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標(biāo)簽:考馬斯亮藍(lán)G250 10g
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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
考馬斯亮藍(lán)G250 | Coomassie Brilliant Blue G250 | 10g | CS-01F98116 |
考馬斯亮藍(lán)是兩種相似三苯甲烷染料的總稱,有G250和R250兩種,結(jié)構(gòu)上前者比后者多了2個(gè)甲基,命名上“G”為Green 的縮寫,因G250的藍(lán)色染料泛淺綠色;命名上“R”為Red的縮寫,因R250的藍(lán)色染料呈微紅色調(diào);“250”表示考馬斯亮藍(lán)的純度。生化實(shí)驗(yàn)中常將考馬斯亮藍(lán)用于蛋白定量和蛋白電泳中蛋白染色。工作原理是:通過與蛋白質(zhì)內(nèi)的氨基和羧基基團(tuán)間的靜電結(jié)合作用以及范德華力,考馬斯亮藍(lán)與蛋白質(zhì)形成但非共價(jià)鍵連接的復(fù)合物。蛋白-染料復(fù)合物的形成穩(wěn)定染料攜帶的負(fù)電荷陰離子(如磺酸基),從而產(chǎn)生在膜上或者膠上肉眼可見的藍(lán)色。
考馬斯亮藍(lán)R250更多用于電泳蛋白的染色,染色靈敏度比氨基黑高5倍,可達(dá)0.1µg蛋白。但是染色背景比較深,需要褪色后才能進(jìn)行蛋白條帶的觀察。考馬斯亮藍(lán)G250對蛋白膠染色的靈敏度相對較差,低檢測到0.5µg蛋白。但是因其在三氯乙酸中不溶而以膠體形式存在,選擇性的和蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物,染色迅速,著色深的蛋白質(zhì)條帶數(shù)秒內(nèi)可以顯現(xiàn)出來,約45min后著色深。而且染色背景低,不需要脫色即可進(jìn)行蛋白條帶的觀察。因此,非常適合對電泳凝膠蛋白的快速定性分析。 考馬斯亮藍(lán)G250較多的用于溶液體系中蛋白的定量分析,即 Bradford蛋白結(jié)合檢測法(Bradford protein-binding assay),此方法利用的就是G250與蛋白質(zhì)結(jié)合的特性,Bradford試劑(也就是酸化的G250溶液)為陽離子,主要為雙質(zhì)子化,溶液為紅色,其大吸收波長(Amax)為470 nm。當(dāng)與蛋白穩(wěn)定結(jié)合后,G250以陽離子,非質(zhì)子化的形式存在,溶液變?yōu)樗{(lán)色,大吸收波長遷移到595 nm。藍(lán)色陽離子形式染料的量與樣本中蛋白的量成正比,因此通過直接測定595nm的吸光度來反映蛋白量。此法的優(yōu)點(diǎn)在于G250與蛋白質(zhì)結(jié)合所需的時(shí)間較短(約2min左右),且結(jié)合的G250-蛋白質(zhì)復(fù)合物室溫下約1h內(nèi)保持穩(wěn)定。反應(yīng)靈敏度高,是一種非常常用的微量蛋白快速定量方法。 產(chǎn)品性質(zhì): 中文別名:酸性藍(lán)90;考馬斯亮藍(lán)G;康美賽藍(lán)G250 英文別名:Acid blue 90 Coomassie Brilliant Blue G CAS:6104-58-1 分子式:C47H48N3NaO7S2 分子量:854.02 外觀:藍(lán)色至紅色結(jié)晶粉末 溶解性:微溶于水,好先溶于甲醇或者乙醇。 |
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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