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DNA快速提取檢測試劑盒

  • 產品貨號：CS-01F96603
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：國產
  • 包裝類型:盒裝
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  • 含量：50次|200次|2000次
  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容：DNA快速提取檢測試劑盒現貨供應，價格實惠。

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DNA快速提取檢測試劑盒

DNA Rapid Extraction and Detection Kit

50次|200次|2000次

CS-01F96603

本試劑盒采用獨特的包裝體系，包含了快速制備基因組DNA和PCR擴增的所有試劑，適用于從植物組織、種子、動物組織、血液樣品、酵母和細菌中一步法提取基因組DNA并用于后續的PCR擴增和檢測。整個提取過程不包含去蛋白、去RNA及其它次生代謝物的過程，無需有機溶劑抽提，無需無水乙醇沉淀，簡便、快捷，而且質量穩定可靠。

本試劑盒提供的2×PCR MasterMix是一種擴增兼容性很的PCR試劑，無需徹底去除蛋白等雜質，便能進行高效特異擴增，該試劑包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應的增劑和優化劑及穩定劑。具有快速簡便、靈敏度高、特異性、穩定性好等特點，特別適合于高通量的篩選。

產品特點：

•簡單快速：無需液氮，5min即可快速提取各種組織DNA。

•材料廣泛：適用于植物葉片、種子、動物組織、血液樣品（新鮮血、抗凝血、血凝塊、干血斑等）、酵母和細菌等材料。

•兼容性：PCR試劑適用于提取的各種來源樣本的DNA擴增。

•基因檢測：特別適合大規模的基因檢測

保存條件：緩沖液B1和緩沖液B2在室溫（15-25℃)干燥條件下可保存12個月；2× PCR MasterMix在-20℃條件下可長期保存，多次凍融不會影響活性，如需經常使用，可存放于4℃。

注意事項：（請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項)

1．樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量下降。

2．對于類似于棉花葉片這種含有酚類較多的樣品，應嚴格控制樣品處理量不過0.4mg，否則會影響PCR反應。

3．緩沖液B1和緩沖液B2應放置于室溫保存，如放在低溫（-20℃或4℃）保存時有沉淀析出，可在37℃水浴中重新溶解沉淀，并搖勻溶液后使用。

 

4．本產品提供的2×PCR Reagent為2×母液，使用時需加入模板和引物，并加入滅菌水補足體積，使其濃度為1×即可進行反應。
實驗步驟：
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻  
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。產品僅用于科研
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物完全分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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