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動植物組織RNA穩定液

  • 產品貨號：CS-01F96414
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：國產
  • 包裝類型:盒裝
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  • 含量：100ml
  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容：動植物組織RNA穩定液現貨供應，價格實惠。

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標簽:動植物組織RNA穩定液 100ml 

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動植物組織RNA穩定液

Tissue Stabilizer

100ml

CS-01F96414

RNA酶廣泛存在環境中，很容易降解新鮮采取的動植物組織、血液、體液等樣本中的RNA，從而使得研究人員在收集完新鮮樣本需要做液氮速凍，或者立即進行RNA的純化，給研究人員的戶外工作帶來很多不便。

動植物組織穩定液（Tissue Stabilizer）是專門開發用于穩定并保護采集樣本內RNA的完整性，一種無毒溶液，可迅速滲入組織，滅活內源RNase。具有以下特點：

1）操作極其簡便：只需要將新鮮組織切成合適大小（≤0.5 cm）的組織塊，浸入5~10倍體積的本品中即可。2）穩定周期長：經本品浸漬的組織/細胞可在37℃保存1天，室溫保存1周，4℃保存4周，-20℃/-80℃長期保存。3）下游兼容性廣：幾乎兼容于所有的RNA分離方法，如Total RNA Extraction Reagent總RNA抽提試劑，以及商業化的幾乎所有RNA抽提試劑盒，包括離心柱抽提法，磁珠純化法等。4）應用性廣：可用于多種動植物組織如腦、心臟、、胰臟、腎臟、脾臟、睪丸、肌肉、植物的莖葉等的保存，還可用于酵母、組織培養細胞等。

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）經本品穩定液處理的樣本還可做DNA的提取，甚至蛋白質的提取，但由于本品會變性蛋白質，因此不適合做天然蛋白的提取。

3）本本品穩定液室溫保存過程中可能會產生一些沉淀，只需要在使用前放到37℃溫育片刻，并搖晃使其重溶即可。

4）本本品穩定液僅適用于新鮮組織，不可用于冰凍組織。若需要保護冰凍組織內RNA的穩定性，可使用我司的本品-ICE冰凍動植物組織RNA穩定-過渡溶液，即可在將冰凍組織恢復為勻漿用的組織狀態，并進行RNA抽提的過程中，維持RNA的穩定性。
實驗步驟：
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻  
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物完全分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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