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RNA極速提取試劑盒(5分鐘)

  • 產品貨號：CS-01F96400
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：國產
  • 包裝類型:盒裝
  • 采購熱度：204
  • 庫存：100
  • CAS號：
  • 方法：
  • 含量：50T
  • 品牌名稱:莼試
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簡介內容：RNA極速提取試劑盒(5分鐘)現貨供應，價格實惠。

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標簽:RNA極速提取試劑盒(5分鐘) 50T 

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RNA極速提取試劑盒(5分鐘)

RNA Ultra-Fast Extraction Kit

50T

CS-01F96400

本試劑盒采用獨特的裂解液，可快速可靠從組織、細胞、抗凝全血、病毒液樣本中純化出高純度的總RNA。該RNA提取試劑盒是目前國際上操作步驟少、用時短的RNA提取試劑盒。應用本試劑盒提取的RNA可直接用于反轉錄、基因克隆、定量檢測、文庫構建、雜交等多種分子生物學實驗。

產品特點：

1．用時短：的裂解能力使得樣品瞬間裂解，組織細胞樣品可在5分鐘內完成總RNA的提取。

2．高純度：該試劑盒采用柱式純化，獲取的RNA A260/A280為2.0～2.2，A260/A230為1.9～2.1。

3．高質量RNA：使用該試劑盒獲取的RNA完整性良好。

4．使用安全：無需酚/氯仿抽提，減少了有毒有害物質。

5．操作極簡化：只需將樣品與裂解液A和B混合，經一步掛柱和洗脫即可獲得高質量總RNA。

產品組成：

組分 規格

RNA LB1 6ml

RNA BB2 25ml

Washing Buffer（已含乙醇） 55ml

Nuclease Free H2O 10ml

吸附柱及收集管 50套

保存條件：室溫，有效期2年。
實驗步驟：
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻  
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物完全分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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