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公司上萬種科研產品，主要供應各大科研單位和學校，是國內眾多科研單位的供應商。公司嚴把質量關，確保每一個出廠產品質量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
| 磷脂酶D（ Phospholipases D，PLD ）試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01Ｓ63838 |
注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
磷脂酶D（EC
測定原理
磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿，膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫，過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉紅色物質，在500nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、無水乙醇。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體102mL×瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體3mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：粉劑×1支，-20℃避光保存。臨用前加1mL無水乙醇充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑四：液體15mL×1瓶，4℃避光保存。
標準品：液體1mL×1支，4℃避光保存。
酶液提取
1.組織：按照質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。
2.細胞：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后于4℃，10000g離心5min，取全部上清于4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。
3.血清：直接測定。
測定操作
酶活計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1．按照蛋白濃度計算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /mg prot）= ×C標準÷Cpr÷T= 16.7×÷Cpr
2．按照樣本質量計算
酶活性定義：每克組織每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /g 鮮重）= ×C標準÷W÷T = 16.7×÷W
3．按照細胞數量計算
酶活性定義：每104個細胞每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /104 cell）= ×C標準÷細胞數量÷T = 16.7×÷細胞數量
4．按照液體體積計算
酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /mL）= ×C標準÷T=16.7×
C標準：標準品濃度，500nmol/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g/mL；T：反應時間，30min
b.用96孔板測定的計算公式如下
1．按照蛋白濃度計算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /mg prot）= ×C標準÷Cpr÷T= 16.7×÷Cpr
2．按照樣本質量計算
酶活性定義：每克組織每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /g 鮮重）= ×C標準÷W÷T = 16.7×÷W
3．按照細胞數量計算
酶活性定義：每104個細胞每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /104 cell）= ×C標準÷細胞數量÷T = 16.7×÷細胞數量
4．按照液體體積計算
酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解磷脂酰膽堿產生1nmol膽堿所需的酶量為一個酶活力單位。
PLD活性（nmol/min /mL）= ×C標準÷T=16.7×
C標準：標準品濃度，500nmol/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g/mL；T：反應時間，30min
注意事項
1.顯色完成后，若有沉淀，于8000rpm，25℃離心5min后取上清測定。
2.吸光值不宜超過1，否則用試劑一將酶液進行稀釋，并在計算公式中乘以稀釋倍數。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者：上海莼試生物技術有限公司
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