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標(biāo)簽:蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase SP）試劑盒
聯(lián)系人:高小姐
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詳細(xì)地址：上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661
公司上萬種科研產(chǎn)品，主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校，是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase, SP）試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01Ｓ63829 |
注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
SP(EC
測定原理：
SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率，即可計算SP活性。
自備實驗用品及儀器：
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1支，-20℃避光保存，臨用前加2.5mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1支，-20℃避光保存，臨用前加5mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
粗酶液提取：
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心10min，取上清待測。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
測定操作表：
1.酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至340nm。
2.操作表
SP活性計算公式：
1. 按照蛋白濃度計算
酶活定義：37℃，pH6.8時，每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH為一個酶活單位。
SP活性（nmol/min/mg prot）=×V反總÷V樣÷Cpr÷T=1608×△A÷Cpr
2.按照樣本質(zhì)量計算
酶活定義：37℃，pH6.8時，每克樣本每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH為一個酶活單位。
SP活性（nmol/min/g 鮮重）=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T=1608×△A÷W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計算
酶活定義：37℃，pH6.8時，每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH為一個酶活單位。
SP活性（nmol/min/104 cell）=×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量（萬個）)÷T=1608×△A÷細(xì)胞數(shù)量（萬個）
：NADPH摩爾消光系數(shù)，6220 L/mol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.02mL；W：樣本質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間，2min
注意事項：
1.可選用BCA法測定蛋白含量試劑盒測定蛋白含量。
2.樣本較多時，可以按照每個樣本試劑一：試劑二：試劑三=120：20：40（μL）的比例配制工作液，用多少配多少，臨用前立刻配制，10分鐘內(nèi)使用。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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產(chǎn)品訂購說明:
1、報價含普票、運(yùn)費(fèi)。
2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請咨詢客服。
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