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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
銅藍蛋白(Ceruloplasmin,Cp)測定試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01S63818 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
銅藍蛋白是血漿的含銅蛋白,有運輸銅的功能,同時具有氧化酶的活性,是細胞外液重要的抗氧化劑。
測定原理:
銅藍蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺生成藍色產物,在645nm處有特征吸收峰,依此可得銅藍蛋白活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體7mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。(使用前37℃預熱)
樣本前處理:
1、血清(漿)等液體樣本:直接檢測。
2、動植物組織樣本:稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水,進行冰浴勻漿。10000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定操作表:
1、分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調節波長至645nm,蒸餾水調零。
2、操作表
計算公式:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、按體積計算
酶活定義:37℃條件下, 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/mL)=ΔA×V反總÷0.01÷V樣÷T = 33.33×ΔA
2、按鮮重計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/g鮮重)=ΔA×V反總÷0.01÷(W×V樣÷V樣總)÷T = 33.33×ΔA÷W
3、按蛋白濃度計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/ mg prot)=ΔA×V反總÷0.01÷(Cpr×V樣)÷T = 33.33×ΔA÷Cpr
V樣:0.03 mL;V反總:0.3 mL;T:反應時間,30min;V樣總:加入提取液體積,1mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g
b.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、按體積計算
酶活定義:37℃條件下, 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力(U/mL)=ΔA×V反總÷0.005÷V樣÷T = 66.66×ΔA
2、按鮮重計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力(U/g鮮重)=ΔA×V反總÷0.005÷(W×V樣÷V樣總)÷T = 66.66×ΔA÷W
3、按蛋白濃度計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個酶活單位。
Cp活力(U/ mg prot)=ΔA×V反總÷0.005÷(Cpr×V樣)÷T = 66.66×ΔA÷Cpr
V樣:0.03 mL;V反總:0.3 mL;T:反應時間,30min;V樣總:加入提取液體積,1mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g
注意事項:
試劑二和試劑三有一定的毒性和刺激性,請操作時做好防護措施。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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