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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
植物原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC)試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01S63816 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)是一類黃烷醇單體及其聚合體的多酚化合物,廣泛存在于植物的各種器官中,具有極強的抗氧化性和清除自由基的作用,廣泛的應用于醫藥,食品,化妝品,保健品行業。
測定原理:
在酸性條件下,植物原花青素A環上的間苯二酚和間苯三酚與香草醛發生縮合反應,產生有色化合物,在500nm處有特征吸收峰,測定500nm光吸收值,可計算植物中原花青素的含量。
自備實驗用品及儀器:
天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水、鹽酸、無水乙醇和甲醇。
試劑組成和配制:
提取液:60%乙醇,自備,4℃保存。(60mL無水乙醇溶于40mL蒸餾水)
試劑一:8%鹽酸10mL,自備,4℃保存。(800μL鹽酸溶于9.2mL甲醇)
試劑二:粉劑0.1g×1瓶,4℃避光保存,臨用前加10mL甲醇溶解。
測定工作液:臨用前按照用量將試劑一和試劑二按照1:1混合。
空白工作液:臨用前按照用量將試劑一和甲醇按照1:1混合。
OPC提取:
稱取約0.1g樣本,加入2mL提取液,勻漿后,60℃振蕩提取2h, 10000g,25℃,離心10min,取上清待測。
測定操作表:
1、分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長至500nm,蒸餾水調零。
2、操作表
OPC計算公式:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線:y=0.0194x+0.0006,R2=0.999
OPC含量(mg/g 鮮重)= (ΔA-0.0006)÷0.0194×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 0.515×(ΔA-0.0006)÷W
V樣總:加入提取液體積,2mL; V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣品體積,0.04mL;W:樣品質量,g
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線:y=0.0097x+0.0006,R2=0.999
OPC含量(mg/g 鮮重)= (ΔA-0.0006)÷0.0097×V反總÷(V樣÷V樣總×W)×10-3
= 1.03×(ΔA-0.0006)÷W
V樣總:加入提取液體積,2mL; V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應中樣品體積,0.04mL;W:樣品質量,g
注意事項:
1、配制好的試劑二應盡快使用,4℃保存時間不超過一個月。
2、吸光度變化應該控制在0.01~0.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計算公式中參與計算的稀釋倍數要相應改變。
3、最低檢出限為10μg/g。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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