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標(biāo)簽:單寧酶（Tannase TAN）試劑盒
聯(lián)系人:高小姐
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詳細(xì)地址：上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661
人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
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公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品，主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校，是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 單寧酶（Tannase，TAN）試劑盒 | 微量法 | 100管/48樣 | CS-01Ｓ63805 |
注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase，EC
測(cè)定原理
使用抗氧化劑沒食子酸丙酯（PG）作為單寧酶酶促反應(yīng)的底物，在270nn下測(cè)定底物PG反應(yīng)前后的光密度變化,計(jì)算單寧酶酶活力。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
試劑一：液體100mL×2瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，4℃保存；臨用前每支加入6mL試劑一，充分溶解后備用；用不完的試劑4℃保存；
粗酶液提取
按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
液體樣本：直接取上清測(cè)定。
測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到270 nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
注意：
1、可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液，然后集中進(jìn)行5min 95℃沸水浴處理。
2、務(wù)必使用96孔UV板（非普通酶標(biāo)板，普通酶標(biāo)板只能透過可見光，不能透過紫外光，檢測(cè)波長(zhǎng)小于340nm務(wù)必使用UV板）。
TAN活力單位的計(jì)算
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 0.0058x + 0.0044，R2 = 0.9994；x為PG含量（μmol/L），y為吸光值。
1、按樣本體積計(jì)算
單位的定義：40℃下每毫升粗酶液每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位。
TAN活性(μmol/min/mL)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V反總÷0.01÷V樣÷T
=34.48×( ΔA-0.0044）
2、按照蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：40℃下每毫克蛋白每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位(U)。
TAN活性((μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V反總÷0.01÷(V樣×Cpr)÷T
=34.48×(ΔA-0.0044）÷Cpr
3、按照樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：40℃下每克樣品每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位(U)。
TAN活性(μmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V反總÷0.01÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=34.48×(ΔA-0.0044）÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1mL； V樣：加入樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，10min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 0.0029x + 0.0044，R2 = 0.9994；x為PG含量（μmol/L），y為吸光值。
1、按樣本體積計(jì)算
單位的定義：40℃下每毫升粗酶液每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位(U)。
TAN活性(μmol/min/mL)=(ΔA-0.0044）÷0.0029÷1000×V反總÷0.01÷V樣÷T
=68.97×( ΔA-0.0044）
2、按照蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：40℃下每毫克蛋白每分鐘水解減少1μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位(U)。
TAN活性(μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0044）÷0.0029÷1000×V反總÷0.01÷(V樣×Cpr)÷T
=68.97×( ΔA-0.0044）÷Cpr
3、按照樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：40℃下每克樣品每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位(U)。
TAN活性(μmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0044）÷0.0029÷1000×V反總÷0.01÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=68.97×( ΔA-0.0044）÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1mL； V樣：加入樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，10min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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