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公司上萬種科研產品，主要供應各大科研單位和學校，是國內眾多科研單位的供應商。公司嚴把質量關，確保每一個出廠產品質量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
| 二胺氧化酶（Diamine Oxidase，DAO）試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01Ｓ63800 |
注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
DAO(EC
測定原理：
DAO催化尸胺產生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰聯茴香胺生成氧化型鄰聯茴香胺，在460nm處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加速率，計算DAO活性。
自備實驗用品及儀器：
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體120mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體0.3mL×1支，4℃保存。
試劑二：液體2.5mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體1.2mL×1管，4℃保存。
粗酶液提取：
1.組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心20min，取上清，置冰上待測。
2.細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3.血清等液體：直接測定。
測定操作表：
1、分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長至460nm，蒸餾水調零。
2、操作表
酶活性計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按樣本質量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按細胞數量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數量）÷T= 18×A460÷細胞數量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε：氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反應時間，30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按樣本質量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按細胞數量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細胞每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數量）÷T= 36×A460÷細胞數量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 36×A460
ε：氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數：7.5 L /mmol/cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：反應中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反應時間，30min
注意事項：
1、如果OD值小于0.01，適當加大提取用樣本量；OD值大于0.8，粗酶液可適當稀釋，或者減少提取用樣本量。
2、樣品蛋白質含量需要另外測定。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者：上海莼試生物技術有限公司
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