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葉綠體復(fù)合體Ⅴ試劑盒微量法100管/48樣

  • 產(chǎn)品貨號(hào):CS-01S63794
  • 產(chǎn)品價(jià)格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:100管/48樣
  • 采購熱度:237
  • 庫存:100
  • CAS號(hào):
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內(nèi)容:葉綠體復(fù)合體Ⅴ試劑盒質(zhì)量可靠、價(jià)格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)。

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標(biāo)簽:葉綠體復(fù)合體Ⅴ試劑盒 

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商品詳情購物流程代測(cè)服務(wù)付款方式常見問題

 公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

葉綠體復(fù)合體Ⅴ試劑盒

微量法

100/48

CS-0163794

   注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

葉綠體復(fù)合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶。該酶利用呼吸鏈產(chǎn)生的質(zhì)子電化學(xué)梯度催化ATP合成,也可逆過程水解ATP。復(fù)合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關(guān)鍵酶。

商品介紹:

測(cè)定原理:

復(fù)合體Ⅴ水解ATP產(chǎn)生ADPPi,通過測(cè)定Pi增加速率來測(cè)定復(fù)合體Ⅴ活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一:100mL×1瓶,-20℃保存;

試劑二:粉劑×1支,-20℃保存;臨用前加入2mL蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存;

試劑三:8mL×1瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入4mL蒸餾水,充分混勻;溶解后4℃保存一周;

試劑五:粉劑×1, 4℃保存;臨用前加入10mL蒸餾水,充分混勻;溶解后4℃保存一周;

試劑六:粉劑×1, 4℃保存;臨用前加入10mL蒸餾水,充分混勻;溶解后4℃保存一周;

試劑七:液體10mL×1 瓶,室溫保存。

定磷試劑的配制:按H2O: 試劑五:試劑六:試劑七=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷試劑應(yīng)為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染(請(qǐng)根據(jù)需要,用多少配多少)。

注意:配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,或者一次性塑料器皿,以避免磷污染。

葉綠體的提?。?/span>

①稱取約0.1g組織或收集500萬細(xì)胞,加入1mL試劑一,用冰浴勻漿器或研缽勻漿,很快研磨或搗碎,30秒內(nèi)完成,使之成為勻漿液。

②將勻漿液于200g(離心率),4℃離心1min。

③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,1500g4℃離心5min

④棄上清液,于沉淀中加入0.5mL試劑一混勻配成葉綠體懸浮液?;靹蚝鬁y(cè)定葉綠體酶活性。

測(cè)定步驟:

1、酶促反應(yīng)(在EP管中加入下列試劑)

復(fù)合體Ⅴ活性計(jì)算:

a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下:

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 1.274x + 0.004x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mmol/L),yA值。

1、組織中復(fù)合體Ⅴ活性的計(jì)算:

1 按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1 nmol 無機(jī)磷定義為一個(gè)酶活性單位。

復(fù)合體Ⅴ活性(nmol/min/mg prot=[(ΔA-0.004) ÷1.274×V反總×106]÷(V樣×Cpr) ÷T

=62.8× (ΔA-0.004) ÷Cpr

此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

2 按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1 nmol 無機(jī)磷定義為一個(gè)酶活性單位。

復(fù)合體Ⅴ活性(nmol/min /g 鮮重)=[(ΔA-0.004) ÷1.274×V反總×106]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T =31.37× (ΔA-0.004) ÷W

3 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1 nmol 無機(jī)磷定義為一個(gè)酶活性單位。

復(fù)合體Ⅴ活性(nmol/min /104 cell=[(ΔA-0.004) ÷1.274×V反總×106]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.063× (ΔA-0.004)

V反總:反應(yīng)體系總體積,1.2×10-4 L; V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,0.5 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500萬。

b.使用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下:

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.637x + 0.004;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mmol/L),yA值。

1 按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1 nmol 無機(jī)磷定義為一個(gè)酶活性單位。

復(fù)合體Ⅴ活性(nmol/min /mg prot=[(ΔA-0.004) ÷0.637×V反總×106]÷(V樣×Cpr) ÷T

=125.6× (ΔA-0.004) ÷Cpr

此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

2 按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1 nmol 無機(jī)磷定義為一個(gè)酶活性單位。

復(fù)合體Ⅴ活性(nmol/min /g 鮮重)=[(ΔA-0.004)÷0.637×V反總×106]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T

=62.74× (ΔA-0.004) ÷W

3 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1 nmol 無機(jī)磷定義為一個(gè)酶活性單位。

復(fù)合體Ⅴ活性(nmol/min /104 cell=[(ΔA-0.004)÷0.637×V反總×106]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T

=0.126× (ΔA-0.004)

V反總:反應(yīng)體系總體積,1.2×10-4 L; V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,0.5 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500萬。

注意:

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。

2、常用試劑備貨充足,除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

  

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

  

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測(cè),標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內(nèi)客戶)。

  

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