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標簽:H2S含量測定試劑盒
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公司上萬種科研產品,主要供應各大科研單位和學校,是國內眾多科研單位的供應商。公司嚴把質量關,確保每一個出廠產品質量合格,讓您買的省心,用得放心。
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
H2S含量測定試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01S63504 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
H2S是一種新型氣態信號分子,存在于腦內的神經遞質,生理濃度的H2S對神經系統海馬的長時程增強功能具有重要的調節作用,并對自發性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發揮著重要的病理生理效應。
測定原理:
H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應生成亞甲基藍,亞甲基藍在665nm處有最大吸收峰,通過測定其吸光值可計算H2S含量。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、酶標儀、96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體16mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體8mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體8mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:液體1.5mL×1管,4℃避光保存。
樣品處理:
1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3.血清(漿):直接測定。
操作表:
1、酶標儀預熱30min,調節波長至665nm。
2、操作表
H2S含量計算公式:
用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線回歸方程為:y = 0.0022x,R2 = 0.9988
(1)組織樣品
a.按照蛋白濃度計算
H2S(nmol/mg prot)=×V反總÷(V樣×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr
b.按照樣本重量計算
H2S(nmol/g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 681.8×ΔA÷W
(3) 細胞
H2S(nmol/104 cell)=×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量(萬個))=681.8×ΔA÷細胞數量(萬個)
(2)液體樣品H2S(nmol/mL)=×V反總÷V樣= 681.8×ΔA
V反總:反應總體積,0.225mL;V樣:反應中樣品體積,0.15mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL
注意事項
最低檢出限為1nmol/mL。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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