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標簽:土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(Solid-N-acetyl-β-D-glucosidase S-NAG)試劑盒
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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(Solid-N-acetyl-β-D-glucosidase, S-NAG)試劑盒 | 微量法 | 100管/48樣 | CS-01S63782 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機體某些病理狀態密切相關。
測定原理:
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10mL蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體15mL×1瓶,4℃保存;
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。
測定步驟:
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至400nm,蒸餾水調零。
2、加樣表
S-NAG活力計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.00645x -0.0054;x為標準品濃度(μmol/L),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產生1 μmol對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
S-NAG活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反總÷W÷T =55.81×(ΔA+0.0054)
T:反應時間,1h=1/24d; V反總:反應體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質量,0.02g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0043x -0.0054;x為標準品濃度(μmol/L),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產生1 μmol對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
S-NAG活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0054) ÷0.0043×V反總÷W÷T =83.72×(ΔA+0.0054)
T:反應時間,1h=1/24d; V反總:反應體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質量,0.02g。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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