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標(biāo)簽:β-木糖苷酶（β- xylosidase）測定試劑盒
聯(lián)系人:高小姐
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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公司上萬種科研產(chǎn)品，主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校，是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| β-木糖苷酶（β- xylosidase）測定試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01Ｓ63764 |
注意：正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
β-木糖苷酶(EC
測定原理：
β-木糖苷酶催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對硝基苯酚，對硝基苯酚在405nm處有特征吸收峰，測定405nm光吸收增加速率，可計(jì)算β-木糖苷酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體1mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心20min，取上清待測。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3.液體：直接檢測。
測定操作表：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至405nm。
2、操作表
β-木糖苷酶活性計(jì)算公式：
a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/mL），y為吸光值ΔA。
1、按蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每毫克蛋白1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷（V樣×Cpr）÷T×1000
= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每克樣品1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鮮重）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每104個(gè)細(xì)胞1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷V樣×V樣總÷細(xì)胞數(shù)量（萬個(gè)）÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 細(xì)胞數(shù)量（萬個(gè)）
（4）按液體體積計(jì)算
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每毫升液體1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mL）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷V樣÷T×1000
=11.34×(ΔA-0.0011)
V樣總：加入提取液體積，1mL； V反總：反應(yīng)總體積，0.12mL；V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.04mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min；1000:1μmol/L=1000nmol/L
b.用96孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=6.613x+0.0011，R2=0.9998；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/mL），y為吸光值ΔA
1、按蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每毫克蛋白1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反總÷（V樣×Cpr）÷T×1000
= 22.68×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每克樣品1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鮮重）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T×1000= 22.68×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每104個(gè)細(xì)胞1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反總÷V樣×V樣總÷細(xì)胞數(shù)量（萬個(gè)）÷T×1000=22.68×(ΔA-0.0011) ÷ 細(xì)胞數(shù)量（萬個(gè)）
（4）按液體體積計(jì)算
酶活定義：45℃，pH7.4時(shí)每毫升液體1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mL）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反總÷V樣÷T×1000
=22.68×(ΔA-0.0011)
V樣總：加入提取液體積，1mL； V反總：反應(yīng)總體積，0.12mL；V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.04mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min；1000:1μmol/mL=1000nmol/mL
ΔA控制在0.01-1范圍內(nèi)，若ΔA大于1，可適當(dāng)減小樣本量。
標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為：0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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