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幾丁質酶(Chitinase)試劑盒微量法100T/48S

  • 產品貨號:CS-01S63758
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:100T/48S
  • 采購熱度:336
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:幾丁質酶(Chitinase)試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:幾丁質酶(Chitinase)試劑盒 

產品目錄

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

幾丁質酶(Chitinase)試劑盒

微量法

100T/48S

CS-0163758

    注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。

商品介紹:

測定原理:

幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與對二甲氨基苯甲醛產生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。

自備實驗用品及儀器

天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(土壤樣品專用)和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體105mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體5mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存。(若出現結晶,可80℃左右加熱溶解后使用)

試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。

試劑四:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。

粗酶液提取:

1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g4℃離心20min,取上清,置冰上待測。

2.真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g4℃,離心20min,取上清置于冰上待測。

3.培養液:直接測定。

測定操作表:

計算公式:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.3088-0.003R2=0.9995

計算公式:

1、按照樣本重量計算

酶活性定義:37℃條件下,每克組織每小時分解幾丁質產生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。

幾丁質酶活性(mg/h/g鮮重)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×W) ÷T

=8.096×(ΔA +0.003)÷W

2、按照蛋白質濃度計算

酶活定義:37℃條件下,每毫克蛋白每小時分解幾丁質產生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。

幾丁質酶活性(mg/h mg prot=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T

= 8.096×(ΔA +0.003)÷Cpr

3、按細胞數量計算

酶活定義:37℃條件下,每104個細胞每小時分解幾丁質產生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。

幾丁質酶活性(mg/h /104 cell=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)

=8.096×(ΔA +0.003)÷細胞數量

4、按液體體積計算

酶活定義:37℃條件下,每毫升培養液每小時分解幾丁質產生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。

幾丁質酶活性(mg/h /mL=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷V=8.096×(ΔA +0.003

V反總:反應體系總體積,1mLV樣:反應體系中樣本體積,0.4mLV樣總:加入提取液體積,1mLW:樣本質量,gCpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

b.96孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.1544x-0.003R2=0.9995

計算公式:

4、按照樣本重量計算

酶活性定義:37℃條件下,每克組織每小時分解幾丁質產生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。

幾丁質酶活性(mg/h/g鮮重)=(ΔA+0.003)÷0.1544×V反總÷(V樣÷V樣總×W) ÷T

=16.192×(ΔA +0.003)÷W

5、按照蛋白質濃度計算

酶活定義:37℃條件下,每毫克蛋白每小時分解幾丁質產生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。

幾丁質酶活性(mg/h mg prot=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T

= 16.192×(ΔA +0.003)÷Cpr

6、按細胞數量計算

酶活定義:37℃條件下,每104個細胞每小時分解幾丁質產生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。

幾丁質酶活性(mg/h /104 cell=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)

=16.192×(ΔA +0.003)÷細胞數量

4、按液體體積計算

酶活定義:37℃條件下,每毫升培養液每小時分解幾丁質產生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。

幾丁質酶活性(mg/h /mL=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反總÷V=16.192×(ΔA +0.003

V反總:反應體系總體積,1mLV樣:反應體系中樣本體積,0.4mLV樣總:加入提取液體積,1mLW:樣本質量,gCpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

注意事項:

1、反應結束后立即進行比色。

2、試劑四有一定的毒性,請操作時做好防護措施。

注意:

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。

  

6、代測免收代測費,一周出結果。

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