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單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)試劑盒微量法100T/96S

  • 產品貨號:CS-01S63753
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:100T/96S
  • 采購熱度:287
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:單胺氧化酶(Monoamine Oxidase MAO)試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)試劑盒

微量法

100T/96S

CS-0163753

   注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無脊椎動物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質代謝,含量較低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纖維化的程度。此外,MAO活性異常導致細胞內單胺類神經遞質運轉出現紊亂,從而引發多種病癥。

商品介紹:

測定原理:

MAO催化單胺類底物脫氨生成相應的醛,進一步氧化成酸;底物在360nm處有特征吸收峰,測定360nm光吸收下降的速率,計算MAO活性。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液一:液體100mL×1瓶,4℃保存。

提取液二:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體120mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體2mL×1管,4℃避光保存。

粗酶液提取:

1.稱取約0.1g樣品,加1 mL預冷的提取液一充分冰浴勻漿,1000g4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉移到另一預冷的離心管,10000g4℃,離心30min,棄上清;加入1mL預冷的提取液二,震蕩混勻,16000g4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預冷的1mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測定)。

2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉移到另一預冷的離心管,10000g4℃,離心30min,棄上清;加入1.0 mL預冷的提取液二,震蕩混勻,16000g4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預冷的1.0 mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測定),取上清置于冰上待測。

3.血清:直接測定。

測定操作表:

1、分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長至360nm

2、操作表

MAO活性計算公式:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、按蛋白含量計算

酶活定義:37℃,pH7.6時,每毫克蛋白質1min內轉化1 nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min / mg prot= ×V反總÷(V樣× Cpr)÷T= 114×ΔA÷Cpr

2、按樣本質量計算:

酶活定義:37℃,pH7.6時,每克樣品1min內轉化1 nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min / g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T = 114×ΔA÷ W

3、按照細胞數量計算

酶活定義:37℃,pH7.6時,每104個細胞1min內轉化1 nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min / 104 cell= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)÷T

= 114×ΔA÷細胞數量

4、按照液體體積計算

酶活定義:37℃,pH7.6時,每升血清1min內轉化1 nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min /L=×V反總÷V=114×ΔA

ε:底物摩爾消光系數,1460L /mol /cmd:比色皿光徑,1cmV反總:反應總體積,0.2mLV樣:反應中樣本體積,0.02mLV樣總:加入提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白濃度,mg/mLT:反應時間,60minW:樣本質量,g

a.用96孔板測定的計算公式如下

1、按蛋白含量計算

酶活定義:37℃,pH7.6時,每毫克蛋白質1min內轉化1 nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min / mg prot= ×V反總÷(V樣× Cpr)÷T= 228×ΔA÷Cpr

2、按樣本質量計算:

酶活定義:37℃,pH7.6時,每克樣品1min內轉化1nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min / g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T = 228×ΔA÷ W

3、按照細胞數量計算

酶活定義:37℃,pH7.6時,每104個細胞1min內轉化1nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min / 104 cell= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量)÷T

= 228×ΔA÷細胞數量

4、按照液體體積計算

酶活定義:37℃,pH7.6時,每升血清1min內轉化1nmol底物的酶量為一個酶活單位。

DAO活性(nmol/min /L=×V反總÷V=228000×ΔA

ε:底物摩爾消光系數,1460L /mol /cm d96孔板光徑,0.5cmV反總:反應總體積,0.2mLV樣:反應中樣本體積,0.02mLV樣總:加入提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白濃度,mg/mLT:反應時間,60minW:樣本質量,g

注意事項:

1、吸光度變化應該控制在0.010.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計算公式中參與計算的稀釋倍數要相應改變。

2、樣品蛋白質含量需要另外測定。

注意:

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。

  

6、代測免收代測費,一周出結果。

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