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NAD激酶（NAD kinase, NADK）試劑盒微量法100管/48樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63384
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:100管/48樣
  • 采購熱度：231
  • 庫存：100
  • CAS號：
  • 方法：微量法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：NAD激酶（NAD kinase, NADK）試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:NAD激酶（NAD kinase  NADK）試劑盒 

產品目錄

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

NAD激酶（NAD kinase, NADK）試劑盒

微量法

100管/48樣

CS-01Ｓ63384

 

   注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

商品介紹：

測定原理：

NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；在340 nm下測定NADPH增加速率。可反映出NADK活性的大小。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體100 mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：液體25 mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存；

試劑四：粉劑×1瓶，-20℃保存；

樣本測定的準備：

1、細菌、細胞或組織樣品的制備：

細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定步驟

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至340nm，蒸餾水調零。

2、將試劑一和試劑二37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴15min以上。

3、工作液Ⅰ的配制：在試劑三中加入5mL試劑一，充分混勻待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；

工作液Ⅱ的配制：在試劑四中加入18mL試劑二，充分混勻待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；

4、加樣表

NADK活性計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、血清（漿）NADK活力的計算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=53.59×ΔA

2、組織、細菌或細胞中NADK活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=53.59×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=53.59×ΔA÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.107×ΔA

V反總：反應體系總體積，1×10-4 L；ε：NADPH摩爾消光系數，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.02 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，15 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細胞總數，500萬。

b.用96孔板測定的計算公式如下

1、血清（漿）NADK活力的計算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=107.18×ΔA

2、組織、細菌或細胞中NADK活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=107.18×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=107.18×ΔA÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。

NADK（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.214×ΔA

V反總：反應體系總體積，1×10-4 L；ε：NADPH摩爾消光系數，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.02 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，15 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細胞總數，500萬。

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

 

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可聯系客服安排專人取樣（限省內客戶）。

  

6、代測免收代測費，一周出結果。

7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內為您補發 損壞產品。

8、如因單位財務制度原因，可申請先發貨，報賬后付款（此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶）。

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普票匯款信息

  

賬 戶 名：上海生物

 

開 戶 行：中國銀行山東省分行營業部

  

賬 號：2169 2341 6278

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