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α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)試劑盒微量法100管/48樣

  • 產(chǎn)品貨號:CS-01S63379
  • 產(chǎn)品價格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:100管/48樣
  • 采購熱度:235
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內(nèi)容:α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)試劑盒質(zhì)量可靠、價格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:α-淀粉酶(α-amylase α-AL)試劑盒 

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商品詳情購物流程代測服務(wù)付款方式常見問題

 公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴把質(zhì)量關(guān),確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)試劑盒

微量法

100/48

CS-01S63379

   注意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:
 

淀粉水解酶,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-AL (EC 3.2.1.1)隨機催化淀粉中α-1,4-糖苷鍵水解,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。

商品介紹:

測定原理:

淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖,還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),在540 nm有吸收峰;通過測定540 nm吸光度增加速率,計算淀粉酶活性。α-AL耐熱,但是β-淀粉酶可在70℃鈍化15min。因此粗酶液經(jīng)過70℃鈍化15min,就只有α-AL能夠催化淀粉水解。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一:液體15mL×1瓶,室溫保存。若有黃色晶體析出,可90℃加熱溶解后再用。

試劑二:液體7.5mL×1瓶,4℃保存。若有沉淀析出,可70℃加熱溶解后使用。

粗酶液提取:

組織:稱取0.1~0.2g樣本(建議稱取約0.1g樣本),加1 mL蒸餾水勻漿;將勻漿倒入離心管中,在室溫下放置提取15min,每隔5min振蕩1次,使其充分提取;3000g25℃離心10min,吸取上清液并且加蒸餾水定容至10 mL,搖勻,即為淀粉酶原液。

血清(漿):直接檢測。

操作步驟和加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):

1、分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到540 nm,蒸餾水調(diào)零。

2、試劑一和試劑二40℃預(yù)熱10min

3、測定步驟:

α-淀粉酶活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、標準條件下測定回歸曲線為y=3.7215x -0.1778 x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。

2、α 淀粉酶活性

1)按照樣本質(zhì)量計算

單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活力單位。

α 淀粉酶活性(mg/min/g鮮重)=[(ΔA0.1778)÷3.7215×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T=1.075×(ΔA0.1778)÷W

2)按照蛋白質(zhì)含量計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。

α 淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(ΔA0.1778)÷3.7215×V反總]÷(V樣×Cpr)÷T=0.1075×(ΔA0.1778) ÷Cpr

3)血清(漿)樣本中α 淀粉酶活性計算

單位定義:每mL血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。

α 淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(ΔA0.1778)÷3.7215×V反總]÷V樣÷T=0.1075×(ΔA0.1778)

反總:反應(yīng)體系總體積,0.15mLV樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.075 mLV樣總:提取液總體積,10 mL Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,gT:反應(yīng)時間,5min

b.96孔板測定的計算公式如下

1、標準條件下測定回歸曲線為y=2.481x -0.1778 x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。

2、α 淀粉酶活性

1)按照樣本質(zhì)量計算

單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活力單位。

α 淀粉酶活性(mg/min/g鮮重)=[(ΔA0.1778)÷2.481×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T=1.612×(ΔA0.1778)÷W

2)按照蛋白質(zhì)含量計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。

α 淀粉酶活性(mg/min/mg prot=[(ΔA0.1778)÷2.481×V反總]÷(V樣×Cpr)÷T =0.1612×(ΔA0.1778) ÷Cpr

3)血清(漿)樣本中α 淀粉酶活性計算

單位定義:每mL血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生1mg還原糖定義為1個酶活性單位。

α 淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(ΔA0.1778)÷2.481×V反總]÷V樣÷T=0.1612×(ΔA0.1778)

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.15mLV樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.075 mLV樣總:提取液總體積,10 mL Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,gT:反應(yīng)時間,5min

注意:

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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