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產品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)試劑盒 | 微量法 | 100管/48樣 | CS-01S63719 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
SBE(EC
測定原理
直鏈淀粉和碘結合后在660nm有特征光吸收,SBE使直鏈淀粉含量減少,從而降低了淀粉-碘復合物在660nm吸收值,一定時間內吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自備的的儀器和用品
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1支,4℃保存;臨用前每支加入1mL蒸餾水,95℃沸水浴充分溶解后備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體13mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體1mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取
按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟
1、分光光度計預熱30min以上,調節(jié)波長到660 nm,蒸餾水調零。
2、加樣表
注意:
1、可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進行5min 95℃沸水浴處理。
2、試劑二如有沉淀,務必沸水浴溶解后使用。
SBE活力單位的計算
1、按照蛋白濃度計算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反應體系中每降低1%碘藍值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/mg prot)=( A對照管-A測定管)/A對照管÷Cpr ×100
2、按照樣本鮮重計算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在反應體系中每降低1%碘藍值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/g 鮮重)=(A對照管-A測定管)/A對照管÷(W÷V樣總)×100
V樣總:提取液總體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術有限公司
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