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標(biāo)簽:可溶性淀粉合成酶（Soluble starch synthase SSS）試劑盒
聯(lián)系人:高小姐
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公司上萬種科研產(chǎn)品，主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校，是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 可溶性淀粉合成酶（Soluble starch synthase，SSS）試劑盒 | 微量法 | 100管/96樣 | CS-01Ｓ63716 |
注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
SSS（EC
測定原理
SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng)，將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上，同時生成ADP，在反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比，340nm下測定NADPH增加量即可計算SSS活性。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：40mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入14mL試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入8mL試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入10mL試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑五：液體×1支，-20℃保存；臨用前加入500μL蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑六：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入500μL蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
粗酶液制備
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在EP管中按順序加入下列試劑
SSS活性計算
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下：
1、按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。
SSS（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V樣) ÷T×稀釋倍數(shù)
=529×ΔA÷Cpr
此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
2、按照樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。
SSS活性（nmol/min /g 鮮重）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（V樣÷V樣總×W）÷T×稀釋倍數(shù)
=529×ΔA÷W
V 反總：反應(yīng)體系總體積，2.6×10-4 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.075 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；稀釋倍數(shù)：1.9；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量。
b.使用96孔板測定的計算公式如下：
1、按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。
SSS（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V樣) ÷T×稀釋倍數(shù)
=1059×ΔA÷Cpr
此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
2、按照樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。
SSS活性（nmol/min/g 鮮重）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（V樣÷V樣總×W）÷T×稀釋倍數(shù) =1059×ΔA÷W
V 反總：反應(yīng)體系總體積，2.6×10-4 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V樣：加入樣本體積，0.075 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；稀釋倍數(shù)：1.9；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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1、報價含普票、運(yùn)費。
2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
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