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標簽:尿素氮(BUN)試劑盒
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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
尿素氮(BUN)試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01S63713 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
尿素是生物體內含氮化合物分解的終產物,在尿酶催化下分解轉化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。
測定原理
樣本中尿素氮在氯化高鐵一磷酸溶液中與二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一種紅色的二嗪化合物,其顏色的深淺與尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法測定尿素氮含量。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
試劑一:液體6mL×1瓶,4℃避光保存,
試劑二:液體60mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
1.組織:按照質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,勻漿后于25℃,10000g離心10min,取上清待測。
2.細胞:按照細胞數量(104個):蒸餾水體積(mL )為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL蒸餾水),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
3.血清或其它液體:直接檢測。
測定操作
尿素氮含量計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定回歸方程為y =2.048x + 0.0229,R2 = 0.9943;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
1、按照血清(漿)或者細胞培養液體積計算
尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)
2、按照樣本質量計算
尿素氮含量mg/g鮮重)= (△A-0.0229)÷2.048×V樣總÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白濃度計算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr
V樣總:加入提取液體積,1 mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定回歸方程為y = 1.024x + 0.0229,R2 = 0.9943; x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
1、按照血清(漿)或者細胞培養液體積計算
尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷1.024=0.9766×(△A-0.0229)
2、按照樣本質量計算
尿素氮含量(mg/g鮮重)= (△A-0.0229)÷1.024×V樣總÷W=0.9766×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白濃度計算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.9776×(△A-0.0229) ÷Cpr
V樣總:加入提取液體積,1 mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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