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脲酶(Urease, UE)測定試劑盒微量法100管/48樣

  • 產品貨號:CS-01S63712
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:100管/48樣
  • 采購熱度:235
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:脲酶(Urease, UE)測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:脲酶(Urease  UE)測定試劑盒 

產品目錄

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

脲酶(Urease, UE)測定試劑盒

微量法

100/48

CS-0163712

   注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

UE能夠水解尿素,產生氨和碳酸。UE活性與有機物質含量、全氮和速效氮含量呈正相關,反應了氮素狀況。

商品介紹:

測定原理:

利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH3-N

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:粉劑×1瓶,臨用前加入9mL蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑4℃保存;

試劑二:液體22mL×1瓶,4℃保存;

試劑三A液:液體×1支,4℃保存;試劑三B液:液體×1瓶,4℃保存;臨用前將A液倒入B液中混合,待用;用不完的試劑4℃保存一周;

試劑四:液體2mL×1瓶,4℃保存;

樣本的前處理:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至578nm,蒸餾水調零。

2、酶促反應

UE活力計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373x為標準品濃度(μg/mL),y為吸光值A

1、血清(漿)UE活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/mL)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷V樣÷T=27.32×(ΔA -0.0373)

單位的定義:每天每g土樣中產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

2、組織、細菌或細胞中1μg NH3-N活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/mg prot)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷(V樣×Cpr)÷T =27.32×(ΔA -0.0373) ÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/ g 鮮重)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T =27.32×(ΔA -0.0373) ÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/104 cell)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.0546×ΔA

10:稀釋倍數;T:反應時間,60min V反總:反應體系總體積:0.3mLV樣:加入反應體系中樣本體積,0.02mLV樣總:提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL W:樣本質量, g500:細菌或細胞總數,500萬。

b.96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.04575x +0.0373x為標準品濃度(μg/mL),y為吸光值A

1、血清(漿)UE活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/mL)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反總÷V樣÷T=54.64×(ΔA -0.0373)

單位的定義:每天每g土樣中產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

2、組織、細菌或細胞中1μg NH3-N活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/mg prot)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反總÷(V樣×Cpr)÷T =54.64×(ΔA -0.0373) ÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T =54.64×(ΔA -0.0373) ÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

UE活力(μg/min/104 cell)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反總÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.1092×ΔA

10:稀釋倍數;T:反應時間,60min V反總:反應體系總體積:0.3mLV樣:加入反應體系中樣本體積,0.02mLV樣總:提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL W:樣本質量, g500:細菌或細胞總數,500萬。

注意:

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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