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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
食品中亞硝酸鹽含量測定試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01S63711 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
在食品中,亞硝酸鹽可與肉品中的肌紅素結合而更安定,在食品加工業中作為保色劑,以維持肉制品的良好外觀,并防止肉毒梭狀芽孢桿菌的產生,提高食用肉制品的安全,但是人體長期攝入亞硝酸鹽過量的食品,可誘發消化系統癌變。
測定原理:
在酸性條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸反應生成重氮化合物,再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物,在540nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器:
天平、研缽或勻漿器、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液一:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
提取液二:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
提取液三:液體50 mL×1瓶,室溫保存。
粉劑四:粉劑 100 mg ×1支,室溫保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理:
稱取樣品約0.2g鮮重或0.05g干重,破碎,加入0.5 mL 提取液一,沸水浴15min,冷卻至室溫,加入0.5 mL提取液二,震蕩搖勻,加0.5 mL 提取液三,用鑷子加少量粉劑四(約1 mg),靜置30min,25℃,8000g離心15 min,取上清液待測。
測定步驟和操作表:
1、分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長至540nm,蒸餾水調零。
2、操作表
注意:空白管只需測定一次。
亞硝酸鹽含量計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線回歸方程為:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x為標準品亞硝酸鈉濃度(μg/ml) y為吸光值A。
NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(A – 0.086)÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體積,1.5 mL; V樣:反應中樣品體積,0.07mL;W:樣品質量,g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線回歸方程為:y=0.141x +0.095,R2= 0. 9991 x為標準品亞硝酸鈉濃度(μg/ml) y為吸光值A。
NO2-(μg/g )=(△A-0.0002)÷0.141×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(△A-0.0002)÷0.141×1.5×0.6668÷W
=7.09×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體積,1.5 mL; V樣:反應中樣品體積,0.07mL;W:樣品質量,g。
注意事項:
1.試劑盒2-8℃保存。
2.試劑對人體有一定的危害,請穿實驗服,戴手套操作。
3.若檢測出得OD值在標準曲線范圍外,請將樣品進行適當的濃縮或稀釋(A540 <0.09濃縮,A540 > 1.5 適當稀釋)。
4.最低檢出限為0.5μg/g。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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