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天冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AS) 活性測定試劑盒微量法100管/96樣

  • 產品貨號:CS-01S63709
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:100管/96樣
  • 采購熱度:291
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:天冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AS) 活性測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:天冬酰胺合成酶(asparagine synthetase AS) 活性測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

天冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AS) 活性測定試劑盒

微量法

100/96

CS-0163709

   注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

天冬酰胺合成酶是廣泛存在于生物體內的一類氨基轉移酶,催化谷氨酞胺的氨基向天冬氨酸轉移。當植物處于氨毒時天冬酞胺的形成是一種解毒反應。

商品介紹:

測定原理:

AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。

需自備儀器和用品:

臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽、冰和雙蒸水。

試劑組成和配制:

試劑一×2瓶,60 mL4 ℃保存;

試劑二×1瓶,40 mL4 ℃保存;

試劑三×1瓶,60 mL,常溫保存;

試劑四×1瓶,5 mL,常溫保存;

試劑五×1瓶,3 mL,常溫保存;

試劑六×1瓶,3 mL,常溫避光保存。

粗酶液提取:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至420nm,蒸餾水調零。

2、樣品測定(在EP管中加入下列試劑):

酶活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.662x -0.0434x為標準品濃度(μg/mL),y為吸光值A

1、血清(漿)AS活性

單位定義:每mL血清(漿)每小時產生1μg 氨定義為一個酶活力單位。

AS(μg/h/mL)=(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反總÷V樣÷T=31.722×(ΔA+0.0434)

2、組織、細菌或細胞中AS活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每小時產生1μg 氨定義為一個酶活力單位。

AS活力(μg/h/mg prot)=(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反總÷(V樣×Cpr)÷T =31.722×(ΔA+0.0434) ÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每小時產生1μg氨定義為一個酶活力單位。

AS活力(μg/h/g 鮮重)=(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T =31.722×(ΔA +0.0434) ÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每小時產生1μg 氨定義為一個酶活力單位。

AS活力(μg/h/104 cell)=(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反總÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.0634×(ΔA+0.0434)

T:反應時間,1h V反總:反應體系總體積:0.525mLV樣:加入反應體系中樣本體積,0.025mLV樣總:提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL W:樣本質量, g500:細菌或細胞總數,500

b.96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.3046x -0.0097x為標準品濃度(μg/mL),y為吸光值A

1、血清(漿)AS活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每小時產生1μg 氨定義為一個酶活力單位。

AS活力(μg/h/mL)=(ΔA +0.0097) ÷0.3046×V反總÷V樣÷T=68.94×(ΔA +0.0097)

2、組織、細菌或細胞中AS活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每小時產生1μg 氨定義為一個酶活力單位。

AS活力(μg/h/mg prot)=(ΔA +0.0097) ÷0.3046×V反總÷(V樣×Cpr)÷T =68.94×(ΔA +0.0097) ÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每小時產生1μg氨定義為一個酶活力單位。

AS活力(μg/h/g 鮮重)=(ΔA +0.0097) ÷0.3046×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T =68.94×(ΔA +0.0097)÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每小時產生1μg 氨定義為一個酶活力單位。

AS活力(μg/h/104 cell)=(ΔA+0.0097) ÷0.3046×V反總÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.1379×(ΔA +0.0097)

T:反應時間,1h V反總:反應體系總體積:0.525mLV樣:加入反應體系中樣本體積,0.025mLV樣總:提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL W:樣本質量, g500:細菌或細胞總數,500萬。

注意:

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。

  

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