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谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)試劑盒微量法100管/48樣

  • 產(chǎn)品貨號(hào):CS-01S63698
  • 產(chǎn)品價(jià)格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 包裝類(lèi)型:100管/48樣
  • 采購(gòu)熱度:254
  • 庫(kù)存:100
  • CAS號(hào):
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡(jiǎn)介內(nèi)容:谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)試劑盒質(zhì)量可靠、價(jià)格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)。

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標(biāo)簽:谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase GS)試劑盒 

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商品詳情購(gòu)物流程代測(cè)服務(wù)付款方式常見(jiàn)問(wèn)題

 公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買(mǎi)的省心,用得放心。

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)試劑盒

微量法

100/48

CS-0163698

   注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

GSEC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過(guò)多的銨離子對(duì)生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。

商品介紹:

測(cè)定原理

GSATPMg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成的絡(luò)合物在540nm處有最大吸收峰,可用分光光度計(jì)測(cè)定。

所需的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

提取液:100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:10mL×1瓶,-20℃保存;臨用前37℃預(yù)熱20min,充分混勻,如有沉淀,靜置10min,取上清待用。

試劑二:10mL×1瓶,-20℃保存;臨用前37℃預(yù)熱20min,充分混勻,如有沉淀,靜置10min,取上清待用。

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。用時(shí)每瓶加入5mL蒸餾水充分溶解待用。

試劑四:15mL×1瓶,4℃保存。

樣本測(cè)定的準(zhǔn)備

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、在EP管中加入下列試劑:

GS活力單位的計(jì)算

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.8348x + 0.0008R2 = 0.9999

1、血清(漿)GS活性

單位定義:每mL血清(漿)在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

計(jì)算公式:

GS(μmol/h/mL=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷V樣÷T

=10.268×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞GS活性

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨酰基異羥肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

GS(μmol/h/mg prot=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷(Cpr×V)÷T

=10.268×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

GS(μmol/h/g 鮮重)=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T

=10.268×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

GS(μmol/h//104 cell=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷T

=0.021×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL; V樣:加入樣本體積,0.07mLV樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,30 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。

b.96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.4174x + 0.0008R2 = 0.9999

1、血清(漿)GS活性

單位定義:每mL血清(漿)在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

計(jì)算公式:

GS(μmol/h/mL=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷V樣÷T

=20.535×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞GS活性

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

GS(μmol/h/mg prot=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷(Cpr×V)÷T

=20.535×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

GS(μmol/h/g 鮮重)=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T

=20.535×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨?;惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。

GS(μmol/h/104 cell=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷T

=0.041×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL V樣:加入樣本體積,0.07mL;V樣總:加入提取液體積,1 mLT:反應(yīng)時(shí)間,30 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。

注意:

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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訂貨流程

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1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。

2、常用試劑備貨充足,除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

  

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

  

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測(cè),標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專(zhuān)人取樣(限省內(nèi)客戶)。

  

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