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標(biāo)簽:谷氨酰胺合成酶（Glutamine synthetase GS）試劑盒
聯(lián)系人:高小姐
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
小鼠糖皮質(zhì)激素受體αelisa檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求
兔β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPX）測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
非紅細(xì)胞血影蛋白β4（SPTβN4）ELISA試劑盒樣本處理及要求
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2（GSK2）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品，主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校，是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買(mǎi)的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 谷氨酰胺合成酶（Glutamine synthetase，GS）試劑盒 | 微量法 | 100管/48樣 | CS-01Ｓ63698 |
注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
GS（EC
測(cè)定原理
GS在ATP和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨；惲u肟酸，在酸性條件下與鐵形成的絡(luò)合物在540nm處有最大吸收峰，可用分光光度計(jì)測(cè)定。
所需的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液：100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：10mL×1瓶，-20℃保存；臨用前37℃預(yù)熱20min，充分混勻，如有沉淀，靜置10min，取上清待用。
試劑二：10mL×1瓶，-20℃保存；臨用前37℃預(yù)熱20min，充分混勻，如有沉淀，靜置10min，取上清待用。
試劑三：粉劑×2瓶，-20℃保存。用時(shí)每瓶加入5mL蒸餾水充分溶解待用。
試劑四：15mL×1瓶，4℃保存。
樣本測(cè)定的準(zhǔn)備
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在EP管中加入下列試劑：
GS活力單位的計(jì)算
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.8348x + 0.0008，R2 = 0.9999
1、血清（漿）GS活性
單位定義：每mL血清（漿）在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨；惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
計(jì)算公式：
GS（μmol/h/mL）=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷V樣÷T
=10.268×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞GS活性
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨酰基異羥肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（μmol/h/mg prot）=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷(Cpr×V樣)÷T
=10.268×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨；惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（μmol/h/g 鮮重）=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T
=10.268×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨；惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（μmol/h//104 cell）=(ΔA-0.0008)÷0.8348×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷T
=0.021×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.3mL； V樣：加入樣本體積，0.07mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬(wàn)。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.4174x + 0.0008，R2 = 0.9999
1、血清（漿）GS活性
單位定義：每mL血清（漿）在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨；惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
計(jì)算公式：
GS（μmol/h/mL）=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷V樣÷T
=20.535×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞GS活性
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨；惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（μmol/h/mg prot）=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷(Cpr×V樣)÷T
=20.535×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨；惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（μmol/h/g 鮮重）=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷T
=20.535×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每小時(shí)產(chǎn)生1μmol γ-谷氨；惲u肟酸定義為一個(gè)酶活力單位。
GS（μmol/h/104 cell）=(ΔA-0.0008)÷0.4174×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷T
=0.041×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.3mL； V樣：加入樣本體積，0.07mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬(wàn)。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。
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