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公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應各大科研單位和學校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應商。公司嚴把質(zhì)量關,確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
脂蛋白酯酶(Lipoprotein lipase,LPL)試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01S63689 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質(zhì)細胞合成的一種酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,以供組織氧化供能和貯存,并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。
測定原理
脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基苯酚,在400nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板。
試劑組成和配制
試劑一:液體105mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體4mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理
1.組織:按照質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清待測。
2.細胞:按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后于4℃,10000g離心10min,取上清待測。
3.血清:直接測定。
計算公式
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線:y= 0.0581x -0.0169,R2=0.9982
1.按照蛋白濃度計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每毫克蛋白每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/mg prot)= (△A+0.0169)÷ 0.0581×V反總÷(V樣×Cpr)÷T
= 17.21×(△A+0.0169)÷Cpr
2.按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每克組織每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/g 鮮重)=(△A+0.0169)÷0.0581×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T
= 17.21×(△A+0.0169)÷W
3.按照細胞數(shù)量計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每104個細胞每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/104 cell)= (△A+0.0169)÷0.0581×V反總÷(V樣×細胞數(shù)量÷V樣總)÷T
= 17.21×(△A+0.0169)÷細胞數(shù)量
4.按照液體體積計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每毫升血清每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/mL)=(△A+0.0169)÷0.0581×V反總÷V樣÷T
= 17.21×(△A+0.0169)
V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,10min
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線:y= 0.029x -0.0169,R2=0.9982
1.按照蛋白濃度計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每毫克蛋白每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/mg prot)= (△A+0.0169)÷ 0.029×V反總÷(V樣×Cpr)÷T
= 34.42×(△A+0.0169)÷Cpr
2.按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每克組織每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/g 鮮重)=(△A+0.0169)÷0.029×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T
= 34.42×(△A+0.0169)÷W
3.按照細胞數(shù)量計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每104個細胞每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/104 cell)= (△A+0.0169)÷0.029×V反總÷(V樣×細胞數(shù)量÷V樣總)÷T
=34.42×(△A+0.0169)÷細胞數(shù)量
4.按照液體體積計算
酶活性定義:在45℃,pH7.5條件下,每毫升血清每分鐘水解產(chǎn)生1μmol 4-硝基苯酚為一個酶活力單位。
LPL活性(μmol /min/mL)=(△A+0.0169)÷0.029×V反總÷V樣÷T
= 34.42×(△A+0.0169)
V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,10min
注意事項
1.試劑三加入混勻后靜置兩分鐘立即測定,否則影響吸光值。
2.吸光值過高或者測定結(jié)果不穩(wěn)定,則將酶液進行適當?shù)南♂專⒃谟嬎愎街谐艘韵♂尡稊?shù)。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術有限公司
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產(chǎn)品訂購說明:
1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當天可發(fā)貨。
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