13585831301
021-59541103 021-60443211
3004967995
13585831301021-59541103 021-604432113004967995
在線訂購 免費訂購熱線：021-59541103 021-60443211
聯系人:高小姐
電話:021-59541103 021-60443211
手機:13585831301
Q Q： 3004967995
Email:3004967995@qq.com
詳細地址：上海嘉定區嘉羅公路1661
公司上萬種科研產品，主要供應各大科研單位和學校，是國內眾多科研單位的供應商。公司嚴把質量關，確保每一個出廠產品質量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
| 酰基轉移酶（alcohol acyl transferase，AAT）活性測定試劑盒 | 微量法 | 100管/96樣 | CS-01Ｓ63688 |
注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
AAT是一個多功能蛋白大家族，主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應，在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。
測定原理：
AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇，釋放的CoA還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測定412 nm吸光度增加速率可計算AAT活性。
自備儀器和用品：
研缽、冰、臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、無水乙醇。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存。
試劑三：粉劑×1支，4℃避光保存。
粗酶液提取：
1.組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。
2.細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3.液體：直接檢測。
AAT測定操作：
1、分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長到412 nm，蒸餾水調零。
2、工作液的配制：臨用前在試劑二瓶中加入18mL試劑一，充分混勻待用。用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
3、試劑三的配制：臨用前加無水乙醇1mL充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存。
4、 空白管：在Ep管或96孔板中加入10μL提取液和180μL工作液，充分混勻，35℃反應15min，加入10μL試劑三，充分混勻，25℃靜置10min，測定412nm處吸光值，記為A空白管。
5、 測定管：在Ep管或96孔板中加入10μL樣本和180μL工作液，充分混勻，35℃反應15min，加入10μL試劑三，充分混勻，25℃靜置10min，測定412nm處吸光值，記為A測定管。△A=A測定管- A空白管，空白管只要做一管。
AAT活性計算：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：每毫克蛋白每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min/mg prot) = △A ÷（×d）×V反總÷（V樣×Cpr）÷T = 98.04×△A÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：每克組織每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min /g 鮮重) = △A ÷（×d）×V反總÷(W×V樣÷V樣總) ÷T
= 98.04×△A÷W
（3）按細胞數量計算
活性單位定義：每104個細胞每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min/104cell) = △A ÷（×d）×V反總÷(細胞數量×V樣÷V樣總) ÷T
= 98.04×△A÷ 細胞數量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：每毫升樣品每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min/mL) = △A ÷（×d）×V反總÷V樣÷T
= 98.04×△A
：TNB消光系數，13600L/mol/cm；d：比色皿光徑：1cm；V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：加入反應體系中上清液體積，0.01mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白含量，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反應時間，15 min。
b.使用96孔板測定的計算公式如下
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：每毫克蛋白每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min/mg prot) = △A ÷（×d）×V反總÷（V樣×Cpr）÷T
=196.08×△A÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：每克組織每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min /g 鮮重) = △A ÷（×d）×V反總÷(W×V樣÷V樣總) ÷T
= 196.08×△A÷W
（3）按細胞數量計算
活性單位定義：每104個細胞每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min/104cell) = △A ÷（×d）×V反總÷(細胞數量×V樣÷V樣總) ÷T
=196.08×△A÷ 細胞數量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：每毫升樣品每分鐘催化產生1nmol TNB定義為一個酶活單位。
AAT (nmol/min/mL) = △A ÷（×d）×V反總÷V樣÷T
= 196.08×△A
：TNB消光系數，13600L/mol/cm；d：96孔板光徑：0.5cm；V反總：反應總體積，0.2mL；V樣：加入反應體系中上清液體積，0.01mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白含量，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反應時間，15min。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者：上海莼試生物技術有限公司
留言注意事項：
1.遵守中華人民共和國有關法律、法規，尊重網上道德，承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。
2.請您真實的反映產品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經本站同意，任何人不得利用本留言簿發布個人或團體的具有廣告性質的信息或類似言論。
| 您感興趣的產品* | |
| 您的單位* | |
| 聯系人* | |
| 聯系電話* | |
| 詳細地址* | |
| 常用郵箱* | |
| 請輸入您對我們的意見或建議* | |
| 驗證碼* | |
 |
產品訂購說明:
1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。
3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可聯系客服安排專人取樣（限省內客戶）。
6、代測免收代測費，一周出結果。
7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內為您補發 損壞產品。
8、如因單位財務制度原因，可申請先發貨，報賬后付款（此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶）。
普票匯款信息
賬 戶 名：上海生物
開 戶 行：中國銀行山東省分行營業部
賬 號：2169 2341 6278
關于莼試
產品訂購
新手指南
幫助中心