聯系人:高小姐
電話:021-59541103 021-60443211
手機:13585831301
Q Q: 3004967995
Email:3004967995@qq.com
詳細地址:上海嘉定區嘉羅公路1661
公司上萬種科研產品,主要供應各大科研單位和學校,是國內眾多科研單位的供應商。公司嚴把質量關,確保每一個出廠產品質量合格,讓您買的省心,用得放心。
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
海藻糖含量試劑盒 | 微量法 | 100管/96樣 | CS-01S63646 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
海藻糖廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。由于海藻糖具有獨特的不同于其他碳水化合物的生物學特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質等惡劣環境下保護生物體細胞蛋白質、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。
測定原理:
蒽酮比色法。具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優點。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板﹑研缽、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100ml×1瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存;
海藻糖提?。?/span>
1、細菌或細胞處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3S,間隔10S,重復30次),室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清。
2、組織的處理:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),冰浴勻漿,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清。
3、血清(漿)的處理:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議取0.1mL血清(漿)加入1mL提取液),冰浴勻漿,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清。
測定步驟:
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至620nm,蒸餾水調零。
2、調節水浴鍋至95度。
3、工作液的配制:臨用前在試劑一中加入3.75mL蒸餾水后,緩慢加入21.25mL濃硫酸,不斷攪拌,充分溶解,待用;用不完的試劑4℃保存一周;
4、樣本測定:取60μL樣本和240μL工作液至EP管中,95度水浴10 min(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻至室溫,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,在620 nm 波長下記錄測定吸光度值A。
注意:由于工作液具有強腐蝕性,請謹慎操作。
若吸光值大于1,請將樣本用提取液稀釋后再測定,計算公式中乘以相應的稀釋倍數。
海藻糖含量計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標準條件下測定回歸方程為y = 8.8976x+0.0729;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按樣本鮮重計算:
海藻糖含量(mg/g 鮮重)= [V1×(A -0.0729)÷8.8976]÷(W×V1÷V2)=0.112×(A -0.0729) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計算:
海藻糖含量(mg/mg prot)= [V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(V1×Cpr)=0.112×(A -0.0729) ÷Cpr。
4、按細菌或細胞密度計算:
海藻糖含量(μg/104 cell)=[1000×V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(500×V1÷V2)=0.224×(A -0.0729)
5、血清(漿)海藻糖含量計算
海藻糖含量(mg/mL)=[V1×(A -0.0729)÷8.8976 )÷(V3×V1÷V2)=1.12×(A -0.0729)
1000:1mg/mL=1000μg/mL;V1:加入反應體系中樣本體積,60μL=0.06mL;V2:加入提取液總體積1mL;;V3:加入血清(漿體積),0.1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、標準條件下測定回歸方程為y = 4.4488x+0.0729;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按樣本鮮重計算:
海藻糖含量(mg/g 鮮重)=[ V1×(A -0.0729)÷4.4488]÷(W×V1÷V2)=0.224×(A -0.0729) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計算:
海藻糖含量(mg/mg prot)= [V1×(A -0.0729)÷4.4488]÷(V1×Cpr)=0.224×(A -0.0729) ÷Cpr。
4、按細菌或細胞密度計算:
海藻糖含量(μg/104cell)=[1000×V1×(A-0.0729)÷4.4488]÷(500×V1÷V2)=0.448×(A -0.0729)
5、血清(漿)海藻糖含量計算
海藻糖含量(mg/mL)=[V1×(A -0.0729)÷4.4488 )÷(V3×V1÷V2)=2.24×(A -0.0729)
1000:1mg/mL=1000μg/mL;V1:加入反應體系中樣本體積,60μL=0.06mL;V2:加入提取液總體積1mL;;V3:加入血清(漿體積),0.1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。
注意:最低檢測限為10μg/g鮮重或0.1μg/ mg prot
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
留言注意事項:
1.遵守中華人民共和國有關法律、法規,尊重網上道德,承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。
2.請您真實的反映產品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經本站同意,任何人不得利用本留言簿發布個人或團體的具有廣告性質的信息或類似言論。
您感興趣的產品* | |
您的單位* | |
聯系人* | |
聯系電話* | |
詳細地址* | |
常用郵箱* | |
請輸入您對我們的意見或建議* | |
驗證碼* | |
產品訂購說明:
1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。
3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。
6、代測免收代測費,一周出結果。
7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收,做退回。我們將在24小時之內為您補發 損壞產品。
8、如因單位財務制度原因,可申請先發貨,報賬后付款(此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶)。
普票匯款信息
賬 戶 名:上海生物
開 戶 行:中國銀行山東省分行營業部
賬 號:2169 2341 6278