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海藻糖含量試劑盒微量法100管/96樣

  • 產品貨號:CS-01S63646
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:100管/96樣
  • 采購熱度:201
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:海藻糖含量試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:海藻糖含量試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

海藻糖含量試劑盒

微量法

100/96

CS-0163646

   注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

海藻糖廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。由于海藻糖具有獨特的不同于其他碳水化合物的生物學特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質等惡劣環境下保護生物體細胞蛋白質、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。

商品介紹:

測定原理:

蒽酮比色法。具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優點。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板﹑研缽、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100ml×1瓶,4℃保存;

試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存;

海藻糖提。

1、細菌或細胞處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3S,間隔10S,重復30次),室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清。

2、組織的處理:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),冰浴勻漿,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清。

3、血清(漿)的處理:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)15~10的比例(建議取0.1mL血清(漿)加入1mL提取液),冰浴勻漿,室溫靜置45min,振蕩3~5次,冷卻后,8000g25℃離心10min,取上清。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至620nm,蒸餾水調零。

2、調節水浴鍋至95度。

3、工作液的配制:臨用前在試劑一中加入3.75mL蒸餾水后,緩慢加入21.25mL濃硫酸,不斷攪拌,充分溶解,待用;用不完的試劑4℃保存一周;

4、樣本測定:取60μL樣本和240μL工作液至EP管中,95度水浴10 min(蓋緊,防止水分散失),自然冷卻至室溫,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,在620 nm 波長下記錄測定吸光度值A

注意:由于工作液具有強腐蝕性,請謹慎操作。

若吸光值大于1,請將樣本用提取液稀釋后再測定,計算公式中乘以相應的稀釋倍數。

海藻糖含量計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、標準條件下測定回歸方程為y = 8.8976x+0.0729;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。

2、按樣本鮮重計算:

海藻糖含量(mg/g 鮮重)= [V1×(A -0.0729)÷8.8976]÷(W×V1÷V2)=0.112×(A -0.0729) ÷W。

3、按樣本蛋白濃度計算:

海藻糖含量(mg/mg prot)= [V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(V1×Cpr)=0.112×(A -0.0729) ÷Cpr。

4、按細菌或細胞密度計算:

海藻糖含量(μg/104 cell)=[1000×V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(500×V1÷V2)=0.224×(A -0.0729)

5、血清(漿)海藻糖含量計算

海藻糖含量(mg/mL)=[V1×(A -0.0729)÷8.8976 )÷(V3×V1÷V2)=1.12×(A -0.0729)

10001mg/mL=1000μg/mL;V1:加入反應體系中樣本體積,60μL=0.06mL;V2:加入提取液總體積1mL;;V3:加入血清(漿體積),0.1mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣品質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。

b.96孔板測定的計算公式如下

1、標準條件下測定回歸方程為y = 4.4488x+0.0729x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。

2、按樣本鮮重計算:

海藻糖含量(mg/g 鮮重)=[ V1×(A -0.0729)÷4.4488]÷(W×V1÷V2)=0.224×(A -0.0729) ÷W

3、按樣本蛋白濃度計算:

海藻糖含量(mg/mg prot)= [V1×(A -0.0729)÷4.4488]÷(V1×Cpr)=0.224×(A -0.0729) ÷Cpr。

4、按細菌或細胞密度計算:

海藻糖含量(μg/104cell)=[1000×V1×(A-0.0729)÷4.4488]÷(500×V1÷V2)=0.448×(A -0.0729)

5、血清(漿)海藻糖含量計算

海藻糖含量(mg/mL)=[V1×(A -0.0729)÷4.4488 )÷(V3×V1÷V2)=2.24×(A -0.0729)

10001mg/mL=1000μg/mL;V1:加入反應體系中樣本體積,60μL=0.06mLV2:加入提取液總體積1mL;;V3:加入血清(漿體積),0.1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。

注意:最低檢測限為10μg/g鮮重或0.1μg/ mg prot

注意:

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。

  

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