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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
植物葉綠素(chlorophyll)含量試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01S63606 |
植物葉綠素廣泛存在于綠色植物組織中,其含量與光合作用、營養狀況密切相關,是反應植物生長狀況的重要指標。
測定原理
葉綠素a和葉綠素b在645nm和663nm處有最大吸收,根據經驗公式可計算得葉綠素a和葉綠素b以及總葉綠素含量。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、10mL玻璃試管、錫箔紙、丙酮。
試劑組成和配制
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。
測定操作
1.稱取約新鮮植物葉片或其它綠色組織,去掉中脈,稱取約0.1g,剪碎,用蒸餾水洗干凈。
2.提取液的準備:取240mL蒸餾水和960mL丙酮,充分混勻待用。
3.加入1mL蒸餾水,少量試劑一(約50mg),在黑暗或弱光條件下充分研磨,轉入10mL玻璃試管。
4.用提取液沖洗研缽,將所有沖洗液轉入玻璃試管,用提取液補充至10mL,玻璃試管置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提3h,觀察試管底部組織殘渣完全變白則提取完全,若組織殘渣未完全變白,繼續浸提至其完全變白。
5.取浸提液200μL于微量石英比色皿/96孔板,提取液調零,測定663nm和645nm處吸光值,分別記為A663和A645 。
計算公式
葉綠素a含量(mg/g 鮮重)=(12.7× A663 – 2.69 × A645)×V提×D÷m÷1000
= 0.01×(12.7× A663 – 2.69 × A645)×D÷m
葉綠素b含量(mg/g 鮮重)=(22.9× A645 – 4.68 × A663)×V提×D÷m÷1000
= 0.01×(22.9× A645 – 4.68 × A663)×D÷m
葉綠素總含量(mg/g 鮮重)=(20.21× A645 +8.02 × A663)×V提×D÷m÷1000
= 0.01×(20.21× A645 +8.02 × A663)×D÷m
V提:提取液體積,10mL;D:稀釋倍數;m:樣本質量,g
注意事項
1.葉綠素對光敏感,研磨和提取等操作盡量避光或者在弱光下進行。
2.一定要浸提至組織殘渣完全變白,否則提取不充分。
3.用提取液沖洗研缽一定要沖洗至所有的綠色物質被轉移至玻璃試管。
4.測定時吸光值超過1,可進行適當稀釋。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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