13585831301
021-59541103 021-60443211
3004967995
13585831301021-59541103 021-604432113004967995
在線訂購(gòu) 免費(fèi)訂購(gòu)熱線：021-59541103 021-60443211
標(biāo)簽:γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）
聯(lián)系人:高小姐
電話:021-59541103 021-60443211
手機(jī):13585831301
Q Q： 3004967995
Email:3004967995@qq.com
詳細(xì)地址：上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661
人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
小鼠糖皮質(zhì)激素受體αelisa檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求
兔β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPX）測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
非紅細(xì)胞血影蛋白β4（SPTβN4）ELISA試劑盒樣本處理及要求
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2（GSK2）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品，主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校，是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 圖 | 微量法 | 100T/96S | CS-01Ｓ63604 |
GCL 是 GSH 合成的限速酶，GSH 對(duì) GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié)，如氧化劑、抗氧化劑、生長(zhǎng)因子和炎癥因子等。GCL活性高低對(duì)GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。
測(cè)定原理：
在ATP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷分子，通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷增加速率，即可計(jì)算出GCL活性。
自備儀器和用品：
冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體105mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加6 mL蒸餾水充分震蕩溶解。
試劑三：粉劑×1管，4℃保存。臨用前加入蒸餾水1.5 mL充分震蕩溶解。
試劑四：液體7mL×1瓶，室溫保存。
試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入12 mL蒸餾水，充分震蕩溶解后，緩緩加入400μL濃硫酸（自備），邊加邊攪拌。
粗酶液提取：
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3.血清等液體：直接測(cè)定。
GCL測(cè)定操作：
1.分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660nm，蒸餾水調(diào)零。
2.空白管：取1.5mLEp管，依次加入試劑一48μL、試劑二52μL、試劑三12μL和蒸餾水24μL，混勻后蓋緊，37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)15 min；再加入試劑四60μL，混勻后，室溫（25℃左右）8000g，離心10 min，取上清100μL，加入試劑五100μL，混勻后蓋緊，45℃水浴10min，冷卻后測(cè)定660nm處光吸收，記為A空白管。
3.測(cè)定管：取1.5mLEp管，依次加入試劑一48μL、試劑二52μL、試劑三12μL和上清液24μL，混勻后蓋緊，37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)15 min；再加入試劑四60μL，混勻后，室溫（25℃左右）8000g，離心10 min，取上清100μL，加入試劑五100μL，混勻后蓋緊，45℃水浴10min，冷卻后測(cè)定660nm處光吸收，記為A測(cè)定管。
注意：空白管只需要測(cè)定一次。
GCL活性計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.1427x，R2=0.9987
a. 使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1). 按蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /mg prot）=[（A測(cè)定管-A空白管）÷0.1427×V反總]÷(Cpr×V樣)÷T
=3.815×（A測(cè)定管-A空白管）÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /g 鮮重）= [（A測(cè)定管-A空白管）÷0.1427×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T
= 3.815×（A測(cè)定管-A空白管）÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /104 cell）=[（A測(cè)定管-A空白管）÷ 0.1427×V反總]÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
= 3.815×（A測(cè)定管-A空白管）÷細(xì)胞數(shù)量
（4）按照液體體積計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每毫升液體每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /mL）= [（A測(cè)定管-A空白管）÷ 0.1427×V反總]÷V樣÷T
= 3.815×（A測(cè)定管-A空白管）
0.1427：回歸方程系數(shù)；V反總：反應(yīng)總體積（mL）196 μL=0.196 mL；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL； V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，24μL =2.4×10-2 mL；V樣總：提取液體積，1 mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間：15min。
b. 使用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.07135x，R2=0.9987
（(1). 按蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /mg prot）= [（A測(cè)定管-A空白管）÷0.07135×V反總]÷(Cpr×V樣)÷T
=7.63×（A測(cè)定管-A空白管）÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /g 鮮重）= [（A測(cè)定管-A空白管）÷0.07135×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T
= 7.63×（A測(cè)定管-A空白管）÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /104 cell）=[（A測(cè)定管-A空白管）÷0.07135×V反總]÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
= 7.63×（A測(cè)定管-A空白管）÷細(xì)胞數(shù)量
（4）按照液體體積計(jì)算
活性單位定義：37℃下，每毫升液體每分鐘催化產(chǎn)生1μg無(wú)機(jī)磷的GCL酶活量為1個(gè)酶活單位。
GCL（μg/min /mL）= [（A測(cè)定管-A空白管）÷0.07135×V反總]÷V樣÷T
=7.63×（A測(cè)定管-A空白管）
0.07135：回歸方程系數(shù)；V反總：反應(yīng)總體積（mL）196 μL=0.196 mL；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL； V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，24μL =2.4×10-2 mL；V樣總：提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間：15min。
注意事項(xiàng)：
（1）樣品處理等過(guò)程均需要在冰上進(jìn)行，且須在當(dāng)日測(cè)定酶活力，以免影響其活力。如果是勻漿液，避免反復(fù)凍融。
（2）所有試劑配制完后，除表明4℃保存外，請(qǐng)于1天內(nèi)用完。
（3）實(shí)驗(yàn)過(guò)程請(qǐng)帶手套，試劑三中有強(qiáng)腐蝕性物質(zhì)，注意不要濺到皮膚上或眼睛內(nèi)。
（4）測(cè)定吸光值時(shí)請(qǐng)于水浴后10～40分鐘內(nèi)測(cè)完。
（5）樣本測(cè)定前先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如吸光值太高，應(yīng)先用試劑一(或者生理鹽水)稀釋到適當(dāng)倍數(shù)，使得吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，哺乳動(dòng)物組織和血液一般稀釋3～5倍。
（6）試劑三配制過(guò)程中，可能會(huì)產(chǎn)生黑色固體，其不影響結(jié)果，注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入。
（7）細(xì)胞中GCL活性測(cè)定時(shí)，細(xì)胞數(shù)目須在300萬(wàn)-500萬(wàn)之間，細(xì)胞中GCL的提取時(shí)可加試劑一（或生理鹽水）后研磨或超聲波處理，不能用細(xì)胞裂解液處理細(xì)胞；
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
留言注意事項(xiàng)：
1.遵守中華人民共和國(guó)有關(guān)法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔(dān)一切因您的行為而直接或間接引起的法律責(zé)任。
2.請(qǐng)您真實(shí)的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對(duì)產(chǎn)品有任何疑問(wèn),也可以留言咨詢。
3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個(gè)人或團(tuán)體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。
| 您感興趣的產(chǎn)品* | |
| 您的單位* | |
| 聯(lián)系人* | |
| 聯(lián)系電話* | |
| 詳細(xì)地址* | |
| 常用郵箱* | |
| 請(qǐng)輸入您對(duì)我們的意見(jiàn)或建議* | |
| 驗(yàn)證碼* | |
 |
產(chǎn)品訂購(gòu)說(shuō)明:
1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。
2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。
4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。
6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。
7、產(chǎn)品因運(yùn)輸途中包裝破損請(qǐng)拒絕簽收，做退回。我們將在24小時(shí)之內(nèi)為您補(bǔ)發(fā) 損壞產(chǎn)品。
8、如因單位財(cái)務(wù)制度原因，可申請(qǐng)先發(fā)貨，報(bào)賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好客戶）。
普票匯款信息
賬 戶 名：上海生物
開(kāi) 戶 行：中國(guó)銀行山東省分行營(yíng)業(yè)部
賬 號(hào)：2169 2341 6278
關(guān)于莼試
產(chǎn)品訂購(gòu)
新手指南
幫助中心