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稱取0.01~0.02g烘干樣本（建議稱取約0.01g）于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑二（乙醚）振蕩5min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑三充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后待測。

測定步驟：

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至620nm，蒸餾水調零。

測定管：在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL樣本， 14μL試劑四，120μL蒸餾水，2μL試劑五，44uL蒸餾水，混勻，測定620nm處吸光值，記為A測定。

空白管：在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL試劑三， 14μL試劑四，120μL蒸餾水，2μL試劑五，44μL蒸餾水，混勻，測定620nm處吸光值，記為A空白。

直鏈淀粉含量計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y=1.755x+0.0062；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計算

直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測定-A空白-0.0062)×V1]÷1.755 ÷(V1×Cpr)=0.57×(A測定-A空白-0.0062) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測定-A空白-0.0062)×V1] ÷1.755÷(W×V1÷V2) =0.57×(A測定-A空白-0.0062) ÷W

V1：加入反應體系中樣本體積，0.02mL；V2：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y= 0.8775x+0.0062；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計算

直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測定-A空白-0.0062)×V1]÷0.8775 ÷(V1×Cpr)=1.14×(A測定-A空白-0.0062) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測定-A空白-0.0062)×V1] ÷0.8775/(W×V1÷V2) =1.14×(A測定-A空白-0.0062) ÷W

V1：加入反應體系中樣本體積，0.02mL；V2：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g

最低檢測限為1mg/g干重或10μg/mgprot。

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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