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谷氨酸脫氫酶(Glutamate dehydrogenase,GDH)試劑盒微量法100管/96樣

  • 產品貨號:CS-01S63581
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:100管/96樣
  • 采購熱度:273
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:谷氨酸脫氫酶(Glutamate dehydrogenase,GDH)試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:谷氨酸脫氫酶(Glutamate dehydrogenase GDH)試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

谷氨酸脫氫酶(Glutamate dehydrogenase,GDH)試劑盒

微量法

100/96

CS-0163581

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

GDHEC 1.4.1.2)廣泛分布于植物中,和谷氨酸合成酶(GOGAT)共同參與谷氨酸的合成,在氨同化和轉化成有機氮化合物的代謝中起重要作用。

商品介紹:

測定原理:

GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH,生成谷氨酸和NAD+,引起340nm吸光度下降。通過測定340nm吸光度的下降速率,計算GDH活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存;

粗酶液提?。?/span>

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

2、樣本測定

1)在試劑二中加入10mL試劑一充分溶解混勻,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min;現配現用(配好后12h內用完);

2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本和190μL試劑二,混勻,立即記錄340nm20s時的吸光值A1 5min20s后的吸光值A2,計算ΔA=A1-A2。

GDH活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、血清(漿)中GDH活力的計算:

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=643×ΔA

2、組織、細菌或細胞中GDH活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=643×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=1.286×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。

b.96孔板測定的計算公式如下

1、血清(漿)中GDH活力的計算:

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min /mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=1286×ΔA

2、組織、細菌或細胞中GDH活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=1286×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GDHnmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=2.572×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d96孔板光徑,0.5cmV樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mLT:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g500:細菌或細胞總數,500萬。

注意:

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。

  

6、代測免收代測費,一周出結果。

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