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公司上萬種科研產品，主要供應各大科研單位和學校，是國內眾多科研單位的供應商。公司嚴把質量關，確保每一個出廠產品質量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
| 氨基酸(amino acid, AA)含量測定試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01Ｓ63573 |
氨基酸(amino acid, AA)含量測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。
測定原理：
氨基酸的α -氨基可與水合茚三酮反應，產生藍紫色化合物，在570 nm有特征吸收峰；通過測定570 nm吸光度，來計算氨基酸含量。
自備儀器及用品：
臺式離心機、水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽、無水乙醇、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇，蓋緊后充分混勻，再加入9.333 mL蒸餾水混勻，避光保存。
試劑四：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水，充分溶解。
標準品：粉劑×1瓶，臨用前加10 mL蒸餾水，充分溶解。1μmol/mL標準液，4℃避光保存。
樣品中AA提取：
1.按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行室溫勻漿，然后轉移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。
2.細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3.血清等液體：直接檢測。
測定操作：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min，調節波長到570 nm，蒸餾水調零。
2. 空白管：取EP管，加入10μL蒸餾水，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。
3. 標準管：取EP管，加入10μL標準品，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。
4. 測定管：取EP管，加入10μL上清液，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。
注意：空白管和標準管只需要測定一次。
氨基酸含量計算公式：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按蛋白濃度計算
氨基酸含量（μmol /mg prot）= [C標準品×V標準品×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白)]÷（V樣×Cpr）
=1×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白) ÷Cpr
（2）按樣本質量計算
氨基酸含量（μmol /g 鮮重）=[C標準品×V標準品×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白)] ÷（V樣總÷V樣）÷W
=1×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白) ÷W
（3）按細胞數量計算
氨基酸含量（μmol /104 cell）=[C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)] ×（V樣總÷V樣×細胞數量）
=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管) ÷細胞數量
（4）按照液體體積計算
氨基酸含量（μmol /mL）=[C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]÷V樣
=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)
C標準品：標準品濃度，1 μmol/mL；V標準品：反應體系中加入標準品體積，0.01 mL；W：樣品質量，g；V樣：反應體系中加入樣品提取液體積，0.01 mL；V樣總：樣品提取液總體積，1mL；；Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL。
b.使用96孔板測定的計算公式如下
（1）按蛋白濃度計算
氨基酸含量（μmol /mg prot）=[C標準品×V標準品×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白)] ÷（V樣×Cpr）
=1×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白) ÷Cpr
（2）按樣本質量計算
氨基酸含量（μmol /g 鮮重）=[C標準品×V標準品×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白)]×（V樣總÷V樣）÷W
=1×(A測定－A空白)÷(A標準－A空白) ÷W
（3）按細胞數量計算
氨基酸含量（μmol /104 cell）= [C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)] ×（V樣總÷V樣×細胞數量）
=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管) ÷細胞數量
（4）按照液體體積計算
氨基酸含量（μmol /mL）=[C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]÷V樣
=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)
C標準品：標準品濃度，1 μmol/mL；V標準品：反應體系中加入標準品體積，0.01 mL；W：樣品質量，g；V樣：反應體系中加入樣品提取液體積，0.01mL；V樣總：樣品提取液總體積，1mL；Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL。
注意事項：
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。
2. 為保證實驗結果的準確性，需先取1-2個樣做預實驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
4．最低檢出限為100μmol/L。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創作者：上海莼試生物技術有限公司
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