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雙縮脲法蛋白質含量測定試劑盒分光光度法50T/48S

  • 產品貨號:CS-01S63223
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:50T/48S
  • 采購熱度:380
  • 庫存:50
  • CAS號:
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:雙縮脲法蛋白質含量測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:雙縮脲法蛋白質含量測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

雙縮脲法蛋白質含量測定試劑盒

分光光度法

50T/48S

CS-0163223

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

樣品可溶性蛋白質含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質含量也用于食品等質量分析。

商品介紹:

測定原理

強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物;紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質,適用于蛋白質濃度高的樣品,尤其是動物材料。

自備儀器和用品

離心機、可見分光光度計、移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。

標準品:液體1mL×1瓶,5 mg/mL4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質提取

1.液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。

2.組織樣品:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(自備,根據需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水))

冰浴勻漿,8000g4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋)

3.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

測定操作

1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到540 nm,蒸餾水調零。

2. 空白管:取1 mL玻璃比色皿,加入200μL蒸餾水,1000μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,于540nm比色,記為A空白管。

3. 標準管:取1 mL玻璃比色皿,加入200μL標準液,1000μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,于540 nm比色,記為A標準管。

4. 測定管:取1 mL玻璃比色皿,加入200μL待測液,1000μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,于540nm比色,記為A測定管。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

樣品中蛋白質濃度計算公式

C待測(mg/mL= C標準管×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)

=5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)

注意事項:

1.樣品蛋白濃度須在1~10mg/ml范圍內,低于1mg/ml不能用此法,高于10mg/ml須做相應稀釋。因此測定前用1~2個樣做預實驗,確保蛋白濃度在1~10mg/ml范圍內。

2.待測樣品蛋白提取可用生理鹽水、雙蒸水或不含蛋白的PBS提取。該法受硫酸銨、Tris緩沖液干擾,提取液中應不含這些物質;否則改用BCA蛋白質含量測定試劑盒。

注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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