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羥脯氨酸（Hydroxyproline，HYP）試劑盒分光光度法50管/48樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63217
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:50管/48樣
  • 采購熱度：414
  • 庫存：42
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：羥脯氨酸（Hydroxyproline，HYP）試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:羥脯氨酸（Hydroxyproline HYP）試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

羥脯氨酸（Hydroxyproline，HYP）試劑盒

分光光度法

50管/48樣

CS-01Ｓ63217

 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：
HYP是機體膠原蛋白主要成分之一，膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和血管等，因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項重要指標。 
商品介紹：

測定原理

樣品經酸水解產生游離的HYP，進一步被氯胺T氧化，氧化產物與對二甲氨基苯甲醛反應，產生紅色化合物，在560nm處有特征吸收峰。通過測定樣品水解液560nm吸光值，可計算HYP含量。

自備實驗用品及儀器

天平、烘箱、玻璃管、離心機、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、無水乙醇、異丙醇、6mol/L鹽酸和蒸餾水。

試劑組成和配制

組織提取液：6mol/L鹽酸，自備。濃鹽酸：H2O（V/V）= 1:1，室溫保存。

細胞提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。

羥脯氨酸提取

1.組織：稱取約0.5g樣品于玻璃管，加入5mL的組織提取液，置于110℃烘箱，水解6至12小時，用提取液定容至5mL，12000g，25℃，離心20min，取上清待測。

2.細胞：取500萬個細胞，加入2mL的細胞提取液，于高壓消毒器中15磅保持30min，自然降壓后待測。

3.血清游離羥脯氨酸提取：取0.2mL血清，加入1mL無水乙醇使蛋白質沉淀，8000g4℃離心5min。將上清倒入另一個EP管，氮吹或沸水浴將乙醇揮發干。冷卻后再加入0.4mL50%異丙醇，充分溶解混勻待測。

測定操作表

樣本（μL）

試劑一（μL）

混勻，室溫靜置20min

試劑二（μL）

H2O（μL）

混勻，60℃，20min，取出后25℃靜置15 min，蒸餾水調零，1mL玻璃比色皿中檢測560nm處吸光值。ΔA=A測定-A對照

羥脯氨酸含量計算公式

標準曲線：y=64.875x+ 0.0251，R2=0.9991

（1）按組織計算

HYP含量（mg/g 鮮重）=（ΔA -0.0251）÷ 64.875×V反總÷(V樣÷V樣總×W)

= 0.385×（ΔA -0.0251）÷W

（2）按細胞計算

HYP含量（mg/104 cell）=（ΔA -0.0251）÷ 64.875×V反總÷V樣×V樣總÷細胞數量(萬個)

= 0.154×（ΔA -0.0251）÷細胞數量（萬個）

（3）按液體體積計算

HYP含量（mg/mL）=（ΔA -0.0251）÷ 64.875×V反總÷V樣×2

= 0.154×（ΔA -0.0251）

V反總：反應總體積，1mL；V樣：反應中樣品體積，0.2mL；V樣總：加入提取液體積， mL； W：樣品質量，g；2，血清吹干后復溶的倍數。

注意事項

1、OD值大于0.8，樣品適當稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數。

2、試劑有一定的毒性，請操作時做好防護措施，防止吸入或與皮膚接觸。

3、最低檢出限為3.8mg/L。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

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