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肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)測定試劑盒分光光度法50管/48樣

  • 產品貨號:CS-01S63239
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:50管/48樣
  • 采購熱度:368
  • 庫存:30
  • CAS號:
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)測定試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:肌酸激酶(Creatine Kinase  CK)測定試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)測定試劑盒

分光光度法

50/48

CS-0163239

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中,能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉磷?;磻?,在能量運轉、肌肉收縮和ATP再生中有重要作用,是臨床診斷心腦疾病的一個重要指標。

商品介紹:

測定原理

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH,導致340nm光吸收值增加。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加15mL蒸餾水溶解。

試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。

工作液:臨用前根據用量將試劑一和試劑二以1:1混合。使用前37℃溫育2min。

粗酶液提取

1.組織樣本:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。

2.血清樣本:直接測定。

測定操作表

1. 紫外分光光度計預熱30min,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

2.在1 mL石英比色皿中加入200μL樣本和300μL蒸餾水,最后加入500μL工作液,立即混勻,37℃下測定初始吸光值A11min后的吸光值A2,ΔAA2-A1。

CK活性計算公式

1、按組織蛋白含量計算

酶活定義:37℃,pH7.0時,每毫克蛋白質1min內催化產生1nmol NADPH為一個酶活單位。

CK活性(nmol/min / mg prot=×V反總÷(V樣×Cpr)= 804×△A÷Cpr

2、按組織樣本質量計算:

酶活定義:37℃,pH7.0時,每克樣品1min內催化產生1nmol NADPH為一個酶活單位。

CK活性(nmol/min /g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 804×△A÷W

3. 按血清計算:

酶活定義:37℃,pH7.0時,每升血清1min內催化產生1nmol NADPH為一個酶活單位。

CK活性(nmol/min /L=×V反總÷V= 804×△A

NADPH摩爾消光系數,6220 L /mol/cm;d:比色皿光徑,1cmV反總:反應體系總體積,1mLV樣:反應體系中樣本體積,0.2mL;T,反應時間,1minCpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g

注意事項

1. 配制好的工作液4℃穩定7天,請配制后盡快使用。

2. 血清的CK不穩定,采集樣本后盡快測定,4℃避光保存可穩定24h。

3. 樣品蛋白質含量需要另外測定,可選用BCA蛋白含量測定試劑盒進行測定。

4. OD值大于0.5可用提取液適當稀釋樣品,并在計算公式中相應的改變稀釋倍數。

注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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