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亞硝酸還原酶(Nitrite reductase,NiR)試劑盒分光光度法50管/24樣

  • 產品貨號:CS-01S63232
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:50管/24樣
  • 采購熱度:346
  • 庫存:20
  • CAS號:
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:亞硝酸還原酶(Nitrite reductase,NiR)試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:亞硝酸還原酶(Nitrite reductase NiR)試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

亞硝酸還原酶(Nitrite reductase,NiR)試劑盒

分光光度法

50/24

CS-0163232

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內,是自然界氮循環過程中的關鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為NONH3,從而減少環境中亞硝態氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對生物體的毒害作用。

商品介紹:

測定原理

亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應亞硝酸還原酶的活性。

需自備的儀器和用品

天平、研缽、可見分光光度計、水浴鍋、低溫離心機、1mL玻璃比色皿。

試劑的組成和配制

提取液:液體80mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加12mL蒸餾水溶解。

試劑三:液體12mL×1瓶,4℃保存。(如出現沉淀可以70-80℃加熱溶解)

試劑四:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。(如出現沉淀可以70-80℃加熱溶解)

試劑五:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。

工作液:臨用前根據用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。

酶液提取

1. 組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g4℃離心10min,取上清置于冰上待測。

測定操作表

計算公式

標準曲線:y = 1.3594x + 0.0072R2 = 0.9997x為標準品濃度(μmol/mL),y為吸光值(A標準管-A空白管)。

1.按照蛋白含量計算

酶活單位定義:每毫克組織蛋白每小時還原1μmol NO2ˉ的量為一個酶活力單位。

NiR(μmol/h /mg prot= [A空白管-(A測定管-A對照管)-0.0072]÷1.3594×V標÷(V樣×Cpr)÷T = 1.47×(A空白管-A測定管+A對照管-0.0072)÷Cpr

2. 按照樣本質量計算

酶活單位定義:每克組織每小時還原1μmol NO2ˉ的量為一個酶活力單位。

NiR(μmol/h/g 鮮重)=[A空白管-(A測定管-A對照管)-0.0072]÷1.3594×V標÷(W ×V樣÷V樣總)÷T = 1.47×(A空白管-A測定管+A對照管-0.0072)÷W

3. 按照細胞數量計算

酶活單位定義:每104個細胞每小時還原1μmol NO2ˉ的量為一個酶活力單位。

NiR(μmol/h /104 cell= [A空白管-(A測定管-A對照管)-0.0072]÷1.3594×V標÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T = 1.47×(A空白管-A測定管+A對照管-0.0072)÷細胞數量

V標:標準液體積,0.2mLV樣:體系中加入樣本體積,0.1mLV樣總:加入提取液體積,1mLT:反應時間,1h Cpr:樣本蛋白含量;W:樣本質量,g

注意事項

1.配制好的工作液3天內使用完。

2.若吸光值超過3,將上清液進行適當的稀釋后再加入工作液顯色,并在計算公式中乘以稀釋倍數。

3.嚴格控制顯色時間,否則會對結果有影響。

4.標準曲線線性范圍為0.03μmol/mL-1.5μmol/mL

5.A空白管-A測定管-A對照管)線性范圍為0.02-3

注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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訂購流程

訂貨流程

產品訂購說明:

  

1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。

  

6、代測免收代測費,一周出結果。

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