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標(biāo)簽:植物葉綠素(chlorophyll)含量試劑盒
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
植物葉綠素(chlorophyll)含量試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63253 |
植物葉綠素廣泛存在于綠色植物組織中,其含量與光合作用、營(yíng)養(yǎng)狀況密切相關(guān),是反應(yīng)植物生長(zhǎng)狀況的重要指標(biāo)。
測(cè)定原理
葉綠素a和葉綠素b在645nm和663nm處有最大吸收,根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式可計(jì)算得葉綠素a和葉綠素b以及總?cè)~綠素含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、10mL玻璃試管、錫箔紙、丙酮。
試劑組成和配制
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。
測(cè)定操作
1.稱取約新鮮植物葉片或其它綠色組織,去掉中脈,稱取約0.1g,剪碎,用蒸餾水洗干凈。
2.提取液的準(zhǔn)備:取120mL蒸餾水和480mL丙酮,充分混勻待用。
3.加入1mL蒸餾水,少量試劑一(約50mg),在黑暗或弱光條件下充分研磨,轉(zhuǎn)入10mL玻璃試管。
4.用提取液沖洗研缽,將所有沖洗液轉(zhuǎn)入玻璃試管,用提取液定容至10mL,玻璃試管置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提3h,觀察試管底部組織殘?jiān)耆儼讋t提取完全,若組織殘?jiān)赐耆儼祝^續(xù)浸提至其完全變白。
5.取浸提液1mL于1mL玻璃比色皿,提取液調(diào)零,測(cè)定663nm和645nm處吸光值,分別記為A663和A645 。
計(jì)算公式
葉綠素a含量(mg/g 鮮重)=(12.7× A663 – 2.69 × A645)×V提×D÷m÷1000
= 0.01×(12.7× A663 – 2.69 × A645)×D÷m
葉綠素b含量(mg/g 鮮重)=(22.9× A645 – 4.68 × A663)×V提×D÷m÷1000
= 0.01×(22.9× A645 – 4.68 × A663)×D÷m
葉綠素總含量(mg/g 鮮重)=(20.21× A645 +8.02 × A663)×V提×D÷m÷1000
= 0.01×(20.21× A645 +8.02 × A663)×D÷m
V提:提取液體積,10mL;D:稀釋倍數(shù);m:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng)
1.葉綠素對(duì)光敏感,研磨和提取等操作盡量避光或者在弱光下進(jìn)行。
2.一定要浸提至組織殘?jiān)耆儼祝駝t提取不充分。
3.用提取液沖洗研缽一定要沖洗至所有的綠色物質(zhì)被轉(zhuǎn)移至玻璃試管。
4.測(cè)定時(shí)吸光值超過(guò)1,可進(jìn)行適當(dāng)稀釋。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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