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標簽:血清鐵濃度檢測試劑盒
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產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
血清鐵濃度檢測試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63268 |
血清鐵是指血液中轉鐵蛋白所結合的鐵,該指標常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血。
測定原理:
亞硫酸鈉還原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+進一步與2, 2’- 聯吡啶顯色,在520nm處有吸收峰,測定該波長光吸收值即可計算血清鐵含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、離心機、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、冰醋酸、氯仿和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前配制,加入20 mL蒸餾水充分溶解。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前配制,加入625μL冰醋酸,加入20 mL蒸餾水充分溶解。
標準液:液體1mL×1支(EP管),10 μmol/L Fe3+標準液,4℃保存。
測定:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到520 nm,蒸餾水調零。
2. 標準液解凍:提前取出標準液,置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管:取EP管,依次加入400 μL蒸餾水,400 μL試劑一,400 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入200 μL氯仿(自備),充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標準管:取EP管,依次加入400 μL標準液,400 μL試劑一,400 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入200 μL氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm測定吸光度,記為A標準管。
5. 測定管:取EP管,依次加入400 μL血清,400 μL試劑一,400 μL試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入200 μL氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:空白管和標準管只需測定一次。
血清鐵濃度計算公式:
血清鐵含量(μmol /dL)=[C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×V總
= (A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
C標準液:10 μmol/L Fe3+標準液;V總:標準液總體積1mL;1 dL=0.1 L。
注意事項:
1、血清鐵含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩定,需現配現用,新配制的試劑當天使用完畢。
3. 最低檢出限為1μmol/L。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司
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