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丙酮酸激酶（Pyruvate kinase，PK）試劑盒分光光度法50管/48樣

  • 產品貨號：CS-01Ｓ63298
  • 產品價格：電議
  • 產品產地：進口、國產
  • 包裝類型:50管/48樣
  • 采購熱度：263
  • 庫存：33
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內容：丙酮酸激酶（Pyruvate kinase，PK）試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:丙酮酸激酶（Pyruvate kinase PK）試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

丙酮酸激酶（Pyruvate kinase，PK）試劑盒

分光光度法

50管/48樣

CS-01Ｓ63298
 注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：

PK（EC 2.7.1.40）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，催化糖酵解過程中的最后一步反應，是糖酵解過程中的主要限速酶之一，也是產生ATP的關鍵酶之一，因此測定PK活性具有重要意義。

商品介紹：

測定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脫氫酶進一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PK活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制

提取液：60mL×1瓶，4℃保存;

試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存；；

試劑二：粉劑×2瓶，-20℃保存；

試劑三：液體25μL×2支，4℃保存；

樣本的前處理

1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定步驟

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至340nm，蒸餾水調零。

2、樣本測定

（1）試劑二的配制：臨用前取試劑二一瓶，加入22.5mL試劑一和2.65mL蒸餾水充分溶解，置于37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴5min；現配現用。

（2）試劑三的配制：臨用前取試劑三一支，加入1.5mL蒸餾水充分溶解待用；現配現用。

（3）在1mL石英比色皿中加入50μL樣本、50μL試劑三和900μL試劑二，混勻，立即記錄340nm處20s時的吸光值A1和 2min20s后的吸光值A2，計算ΔA=A1-A2。

PK活性計算

1、血清（漿）中PK活力的計算:

單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=2613×ΔA

2、組織、細菌或細胞中PK活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=2613×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T=2613×ΔA÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=5.226×ΔA

V反總：反應體系總體積，9.75×10-4 L；ε：NADH摩爾消光系數，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.03 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應時間，2min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細胞總數，500萬。

注意：
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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訂貨流程

產品訂購說明:

  

1、報價含普票、運費。

 

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發貨。

  

3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測，標本對環境溫度高，可聯系客服安排專人取樣（限省內客戶）。

  

6、代測免收代測費，一周出結果。

7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內為您補發 損壞產品。

8、如因單位財務制度原因，可申請先發貨，報賬后付款（此條款僅限醫院、學校信譽良好客戶）。

付款方式

普票匯款信息

  

賬 戶 名：上海生物

 

開 戶 行：中國銀行山東省分行營業部

  

賬 號：2169 2341 6278

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