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產品名稱	檢測方法	規格	貨號
土壤堿性磷酸酶（soil alkaline phosphatase，S-AKP/ALP）活性測定試劑盒	分光光度法	50管/48樣	CS-01Ｓ63313

注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍，分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

商品介紹：

測定原理：

堿性環境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉，通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性。

自備儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前加50mL蒸餾水充分溶解。

試劑三：液體×1瓶，4℃保存。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1152μL無水乙醇（自備），48 μL蒸餾水充分溶解。（變褐色后不能再使用）

標準品：液體×1瓶，0.5μmol/mL苯酚標準液，4℃保存。

催化反應：

稱取風干混勻土壤約0.1g，加入50μL甲苯（自備），輕搖15min；加400μL試劑一并且搖勻后，置于37℃恒溫培養箱，開始計時，催化反應24h；到時后迅速加入1mL試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應。8000g，25℃離心10min，取上清液置于冰上待測。

顯色反應：

1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到660 nm，蒸餾水調零。

2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL蒸餾水，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后25℃靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A空白管。

3. 標準管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL標準液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后25℃靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A標準管。

4. 測定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL上清液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后25℃靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A測定管。

注意：空白管和標準管只需測定一次。

S-ALP活性計算公式：

活性單位定義：37℃中每克土壤每天釋放1μmol酚為1個酶活單位。

S-AKP/ALP（μmol/d/g土樣）=[C標準液×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]×V總÷W÷T

= 0.725×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)÷W

C標準液：0.5μmol/mL；V總：催化體系總體積，1.45mL；W：土壤樣品質量，g；T：催化反應時間，24 h=1 d。

注意：

1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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