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脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性試劑盒分光光度法25管/24樣

  • 產品貨號:CS-01S63344
  • 產品價格:電議
  • 產品產地:進口、國產
  • 包裝類型:25管/24樣
  • 采購熱度:361
  • 庫存:40
  • CAS號:
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內容:脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性試劑盒質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:脂肪酸合成酶(fatty acid synthase FAS)活性試劑盒 

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產品名稱

檢測方法

規格

貨號

脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性試劑盒

分光光度法

25/24

CS-0163344

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

FAS是脂肪酸合成關鍵酶,催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。

商品介紹:

測定原理:

FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoANADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+;NADPH340nm有吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm 光吸收下降速率,計算FAS活性。

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調式移液槍和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體25mL×1瓶,-20℃保存。用前1 d取出置于4℃充分解凍后混勻。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入550 μL試劑四,充分溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入550 μL試劑四,充分溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑四:液體25mL×1瓶,4℃保存。

試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入1050 μL試劑四,充分溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

粗酶液提?。?/span>

1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。12000g,4℃離心40min,取上清置冰上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后12000g4℃,離心40min,取上清置于冰上待測。

3.血清等液體:直接測定。

FAS測定操作:

1. 分光光度計預熱30min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑四置于40℃水浴中預熱30 min

3. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、20μL試劑二、20μL試劑三、820μL試劑四和40μL試劑五,迅速混勻后于340nm處測定吸光值,記錄第30s90s時吸光值,分別記錄為A1A2。△A=A1-A2

FAS活性計算公式:

1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol/min/mg prot) =(A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V)÷T

=1608×△A÷Cpr

2)按照樣本質量計算

活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol/min/g 鮮重) = (A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷W

3)按細胞數量計算

活性單位定義:37℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol /min/104cell) = (A÷ε÷d×V反總×109) ÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細胞數量

4)按液體體積計算

活性單位定義:37℃中每毫升樣本每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol /min/mL) =(A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cmV反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,gV樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mLT:反應時間,1min。

注意:
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

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